【摘要】 目的 建立寧心膠囊定性鑒別方法。方法 采用薄層色譜法,分別以化學對照品、藥材為對照,鑒別樣品中丹參、黃芪、苦參等主要組成藥物。結果 樣品薄層色譜分別與化學對照品(丹參酮ⅡA、黃芪甲苷、苦參堿)及對照藥材(丹參、黃芪、苦參)薄層色譜在相應位置上顯相同顏色斑點。結論 定性鑒別方法重復性、可行性好,為寧心膠囊制定定性質量標準提供了依據。
【關鍵詞】 寧心膠囊;薄層色譜法;丹參酮ⅡA;黃芪甲苷;苦參堿
Abstract：Objective To establish the qualitative identification methods of Ninxin Capsules. Methods TLC method was used to identify salvia miltiorrhiza, membranous milk vetch root, radix sophorae flavescentis, with chemical substance and medicinal materials as reference. Results The spots for TLC identification of sample, preparation of chemical reference (Tanshinone IIA, astragaloside, matrine) and medicinal materials (salvia miltiorrhiza, membranous milk vetch root, radix sophorae flavescentis) were in the same position with the same color. Conclusion The method is reproducible and feasible, and provides basis for the qualitative quality standard of Ninxin Capsules.
Key words：Ninxin Capsules;TLC;Tanshinone IIA;astragaloside;matrine
寧心膠囊為本院制劑,由丹參、黃芪、苦參等藥物組成,具有寧心安神、益氣養心、活血通脈功效和抗心律失常作用,對胸痛、心悸也有良好的治療效果。本試驗采用薄層色譜法,對寧心膠囊樣品中的主要組成藥物丹參、黃芪、苦參等進行定性鑒別,為本品的質量控制提供依據。現將試驗結果報道如下。
1 儀器與試藥
PBQ-1型自動鋪板器(重慶南岸動力儀器廠),恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司),紫外透射反射儀(北京六一儀器廠),KQ-500超聲波清洗器(上海超聲波儀器廠)等。
寧心膠囊(本院制劑室自制,批號080613、081025、090301);對照藥材丹參、黃芪、苦參(購自江蘇南通鑫鑫醫藥藥材有限公司,經本院陳峰生主任中藥師鑒定);對照品丹參酮ⅡA(批號110766-200416)、黃芪甲苷(批號781-9002)、苦參堿(批號 100078-200414),供含量測定用,購自中國藥品生物制品檢定所。硅膠G(青島海洋化工有限公司產品)。所用化學試劑均為分析純。
2 方法與結果
2.1 丹參的鑒別
取丹參酮ⅡA對照品,加乙酸乙酯制成每1 mL含2 mg的溶液,作為對照品溶液。取本品內容物粉末2 g,加乙醚10 mL,置具塞試管中,超聲提取30 min,濾過,濾液揮干,殘渣加醋酸乙酯1 mL使溶解,作為供試品溶液。取丹參藥材1 g,按上述供試品溶液的制備方法制成對照藥材溶液。按處方量,取除丹參外的其余藥味按工藝要求制成缺丹參的樣品,按供試品溶液制備方法制備陰性供試品溶液。吸取上述溶液各5 ?L,分別點于以同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,照薄層色譜法[2005年版《中華人民共和國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗[1],以苯- 乙酸乙酯(19∶1)為展開劑,展開,取出,晾干, 10%硫酸乙醇液噴霧顯色,熱風吹干(80 ℃),日光下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材、對照品色譜相應位置上顯相同的暗紅色斑點。
2.2 黃芪的鑒別
取黃芪甲苷對照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作為對照品溶液。取本品內容物粉末2 g,置索氏提取器中,加甲醇50 mL冷浸1 h,水浴回流2 h;提取液回收甲醇并濃縮至干,殘楂加水10 mL微熱使溶解;用水飽和的正丁醇萃取3次,合并正丁醇萃取液,用氨試液處理2次,棄除氨液,正丁醇液蒸干,殘渣加水3～5 mL使溶解,放冷;通過D101型大孔吸附樹脂柱,先以水50 mL洗脫,棄除水液,再用40%乙醇30 mL洗脫,棄除40%乙醇液,繼用70%乙醇50 mL洗脫,收集洗脫液,蒸干,用甲醇溶解并轉移至2 mL量瓶內,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。取黃芪藥材粉末1.5 g,依上述供試品溶液的制備方法制備對照藥材溶液。按處方量,取除黃芪外的其余藥味,按工藝要求制成缺黃芪的樣品,按供試品溶液的制備方法,制備陰性供試品溶液。吸取上述溶液各5 ?L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,照薄層色譜法[2005年版《中華人民共和國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗[1],以氯仿 -甲醇-水(13∶6∶2)(10 ℃以下放置過夜)為展開劑,展開,取出,晾開。噴霧10%硫酸乙醇液顯色,熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材、對照品色譜相應位置上顯相同的暗藍色斑點。
2.3 苦參的鑒別
取苦參堿對照品適量,加氯仿制成每1 mL含1 mg的溶液,作為對照品溶液。取本品內容物粉末1 g,置具塞錐形瓶中,加氯仿-氨水(25∶0.3)20 mL,超聲提取20 min,濾過,水浴蒸干,加氯仿適量溶解,濾過,定容至10 mL,作為供試品溶液。取苦參藥材粉末0.5 g,加氯仿25 mL,濃氨試液0.3 mL,放置過夜,濾過,濾夜蒸干,殘渣加氯仿0.5 mL使溶解,作為對照藥材溶液。按處方量,取除苦參外的其余藥味,按工藝要求制成缺苦參的樣品,按供試品溶液的制備方法制備陰性供試品溶液。取上述4種溶液各5 ?L,分別點于同一以2%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上,照薄層色譜法[2005年版《中華人民共和國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗[1],以苯-丙酮-甲醇(8∶3∶0.5)為展開劑,展開,取出,晾開,噴以碘化鉍鉀試液,熱風吹干。供試品色譜中,在與對照藥材、對照品色譜相應位置上顯相同的鮮紅色斑點,而陰性供試品色譜在此位置上無斑點。
注：1,2.對照品;3,4.對照藥材;5,6.供試品;7,8.陰性供試品
3 討論
苦參是本制劑的主要成分之一,筆者參考文獻[2]對苦參進行定性鑒別,同時對方中丹參、黃芪進行了定性鑒別。試驗結果顯示,制劑中丹參、黃芪、苦參藥材的薄層定性鑒別斑點清晰明顯,結果重復性好,可作為寧心膠囊制訂定性質量標準依據。本品君、臣藥指標性成分的含量測定方法與標準有待進一步研究制定。
【參考文獻】
[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京：化學工業出版社,2005.附錄31.
[2] 錢 梅,徐金榮,周進軍.寧心膠囊的質量標準探討[J].時珍國醫國藥, 2006,17(5)：782.
