1.割(剪)尾采血
當所需血量很少時采用本法。固定動物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的溫水中數分鐘,使尾部血管充盈。再將尾擦干,用銳器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取,采血結束,傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口,割破尾動脈或靜脈,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。
2.鼠尾刺血法
大鼠用血量不多時(僅做白細胞計數或血紅蛋白檢查),可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7號或8號注射針頭,刺入鼠尾靜脈,拔出針頭時即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果長期反復取血,應先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐漸向近心端穿刺。
3.眼眶靜脈叢采血
采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部(大鼠采血需帶上紗手套),應防止動物窒息。當取血時左手拇指及食指輕輕壓迫動物的頸部兩側,使眶后靜脈叢充血。右手持續接7號針頭的1ml注射器或長頸(3~4cm)硬質玻璃滴管(毛細管內徑0.5-1.0mm),使采血器與鼠面成45℃的夾角,由眼內角刺入,針頭斜面先向眼球,刺入后再轉180度使斜面對著眼眶后界。刺入濃度,小鼠約2~3mm,大鼠約4~5mm。當感到有阻力時即停止推進,同時,將針退出約0.1-0.5mm,邊退邊抽。若穿刺適當血液能自然流入毛細管中,當得到所需的血量后,即除去加于頸部的壓力,同時,將采血器拔出,以防止術后穿刺孔出血。
若技術熟練,用本法短期內可重復采血均無多大困難。左右兩眼輪換更好。體重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;體重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可適用于某些生物化學項目的檢驗。
4.斷頭取血
采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大(小)鼠的頸部皮膚,并作動物頭朝下傾的姿勢。右手用剪刀猛剪鼠頸,約1/2-4/5的頸部前剪斷,讓血自由滴入盛器。小鼠可采用約0.8~1.2ml;大鼠約5-10ml。
5.心臟采血
鼠類的心臟較小,且心率較快,心臟采血比較困難,故少用。活體采血方法與豚鼠相同。若做開胸一次死亡采血,先將動物作深麻醉,打開胸腔,暴露心臟,用針頭刺入右心室,吸取血液。小鼠約0.5-0.6ml;大鼠約0.8-1.2ml。
6.頸動靜脈采血
先將動物仰位固定,切開頸部皮膚,分離皮下結締組織,使頸靜脈充分暴露,可用注射器吸出血液。在氣管兩側分離出頸動脈,離心端結扎,向心端剪口將血滴入試管內。
7.腹主動脈采血
最好先將動物麻醉,仰臥固定在手術架上,從腹正中線皮膚切開腹腔,使腹主動脈清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用無齒鑷子剝離結締組織,夾住動脈近心端,用尖頭手術剪刀,剪斷動脈,使血液噴入盛器。
8.股動(靜)脈采血
先由助手握住動物,采血者左手拉直動物下肢,使靜脈充盈。或者以搏動為指標,右手用注射器刺入血管。體重15-20g 小鼠采血約0.2-0.8ml,大鼠約0.4-0.6ml。
(二)豚鼠采血法
1.耳緣剪口采血
將耳消毒后,用銳器(刀或刀片)割破耳緣,在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液,阻止血凝,則血可自切口自動流出,進入盛器。操作時,使耳充血效果較好。此法能采血0.5ml左右。
2.心臟采血
取血前應探明心臟搏動最強部位,通常在胸骨左緣的正中,選心跳最顯的部位作穿刺。針頭宜稍細長些,以免發生手術后穿刺孔出血,其操作手法詳見兔心臟采血。因豚鼠身體較小,一般可不必將動物固定在解剖臺上,而可由助手握住前后肢進行采血即可。成年豚鼠每周采血應不超過10ml為宜。
3.肌動脈采血
將動脈仰位固定在手術臺上,剪去腹股溝區的毛,麻醉后,局部用碘酒消毒。切開長約2-3cm的皮膚,使股動脈暴露及分離。然后,用鑷子提起股動脈,遠端結扎,近端用止血鉗夾住,在動脈中央剪一小孔,用無菌玻璃小導管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入,放開止血鉗,血液即導管口流出。一次可采血10-20ml。
4.背中足靜脈取血
助手固定動物,將其右或左右膝關節伸直提到術者面前。術者將動物腳背面用酒精消毒,找出背中足靜脈后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿的注射針刺入靜脈。拔針后立即出血,呈半球狀隆起。采血后,用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復采血時,兩后肢交替使用。
(三)兔采血法
1.耳靜脈采血
本法為最常用的取血法之一,常作多次反復取血用,因此,保護耳緣靜脈,防止發生栓塞特別重要。
將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中,或由助手以手扶住。選耳靜脈清晰的耳朵,將耳靜脈部位的毛拔去,用75%酒精局部消毒,待干。用手指輕輕摩擦兔耳,使靜脈擴張,用連有5(1/2)號針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或將針頭逆血流方向刺入耳緣靜脈取血,取血完畢用棉球壓迫止血,此種采血法一次最多可采血5-10ml。
2.耳中央動脈采血
將兔置于兔固定筒內,在兔耳的中央有一條較粗、顏色較鮮紅的中央動脈,用左手固定兔耳,右手取注射器,在中央動脈的末端,沿著動脈平行地向心方向刺入動脈,即可見動脈血進入針筒,取血完畢后注意止血。此法一次抽血可達15ml。但抽血時應注意,由于兔耳中央動脈容易發生痙攣性收縮,因此抽血前,必須先讓兔耳充分充血,當動脈擴張,未發生痙攣性收縮之前立即進行抽血,如果等待時間過長,動脈經常會發生較長時間的痙攣性收縮。取血用的針頭一般用6號針頭,不要太細。針刺部位從中央動脈末端開始。不要在近耳根部取血,因耳根部軟組織厚,血管位置略深,易刺透血管造成皮下出血。
3.心臟取血
將家兔仰臥固定,在第三肋間胸骨左緣3毫米處注射針垂直刺入心臟,血液隨即進入針管。注意事項有:⑴動作宜迅速,以縮短在心臟內的留針時間和防止血液凝固;⑵如針頭已進入心臟但抽不出血時,應將針頭稍微后退一點。⑶在胸腔內針頭不應左右擺動以防止傷及心,肺、一次可取血20-25ml。