液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致。但由于在液相色譜中以液體代替氣相色譜中的氣體作為流動相,而液體和氣體的性質不相同;此外,液相色譜所用的儀器設備和操作條件也與氣相色譜不同,所以,液相色譜與氣相色譜有一定差別,主要有以下幾方面:
(1)應用范圍不同
氣相色譜僅能分析在操作溫度下能氣化而不分解的物質。對高沸點化合物、非揮發性物質、熱不穩定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難。致使其應用受到一定程度的限制,據統計只有大約20%的有機物能用氣相色譜分析;而液相色譜則不受樣品揮發度和熱穩定性的限制,它非常適合分子量較大、難氣化、不易揮發或對熱敏感的物質、離子型化合物及高聚物的分離分析,大約占有機物的70 ~ 80%。
(2)液相色譜能完成難度較高的分離工作因為:
①氣相色譜的流動相載氣是色譜惰性的,不參與分配平衡過程,與樣品分子無親和作用,樣品分子只與固定相相互作用。而在液相色譜中流動相液體也與固定相爭奪樣品分子,為提高選擇性增加了一個因素。也可選用不同比例的兩種或兩種以上的液體作流動相,增大分離的選擇性。
②液相色譜固定相類型多,如離子交換色譜和排阻色譜。等,作為分析時選擇余地大;而氣相色譜并不可能的。
③ 液相色譜通常在室溫下操作,較低的溫度,一般有利于色譜分離條件的選擇。
(3)由于液體的擴散性比氣體的小105倍,因此,溶質在液相中的傳質速率慢,柱外效應就顯得特別重要;而在氣相色譜中,柱外區域擴張可以忽略不計。
(4)液相色譜中制備樣品簡單,回收樣品也比較容易,而且回收是定量的,適合于大量制備。
但液相色譜尚缺乏通用的檢測器,儀器比較復雜,價格昂貴。在實際應用中,這兩種色譜技術是互相補充的。綜上所述,高效液相色譜法具有高柱效、高選擇性、分析速度快、靈敏度高、重復性好、應用范圍廣等優點。該法已成為現代分析技術的重要手段之一,目前在化學、化工、醫藥、生化、環保、農業等科學領域獲得廣泛的應用。