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  • 發布時間:2020-07-13 13:08 原文鏈接: 密度梯度分離法分離單個核細胞(MNCs)

    試劑和材料:
    1. 合適的培養基或冷凍液;
    2. PBSA;
    3. Ficoll-Hypague;
    4. 巴氏吸管;
    5. 50ml離心管;

    實驗方法:
    1. 將臍血樣品用PBSA按1:1比例稀釋;
    2. 將15ml Ficoll-Hypague吸入50ml離心管;
    3. 將30mlPBSA稀釋的臍血樣品緩慢地加到Ficoll-Hypague上;
    4. 室溫450g離心20-30min;
    5. 離心后,在Ficoll-Hypague液面上明細可見一層細胞,是密度低于Ficoll-Hypague液的單個核細胞層;
    6. 用巴氏吸管,將單個核細胞層吸出,轉移到另一離心管中;
    7. 用PBSA洗細胞,室溫200g離心10min;
    8. 倒掉上清,用PBSA重懸細胞,洗細胞,重復上述步驟7;
    9. 最后,用合適的培養基重懸細胞(冰凍液或培養基);


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