巨噬細胞的活化經歷兩個階段：致敏階段和激活階段。活化巨噬細胞的方案多采用一 步 法 （致敏并且激活），本方案則明確區分巨噬細胞活化的這兩個階段。經過一段時間 誘 導 后 （48?72h) ，可 檢 測 巨 噬 細 胞 對 病 原 體 （如寄生蟲或細菌；單 元 6. 5 和 6. 6)的殺傷作用或所合成的活性氮介質（reactive nitrogen intermediates， R N I ; 單 元 6. 5)。
| 實驗步驟 | 基本方案 小鼠巨噬細胞的活化材料小鼠巨噬細胞，靜 息 狀 態（單 元 6.1) D M E M - 10 : 含 1 0 % (V /V ) FBS (HyCloxie) 和 50 ug/1111 硫酸慶大霉素的 D M E M 培 養 基（G I B C O /B R L ) 輔助方案炎性小鼠巨噬細胞的活化附加材料炎性巨噬細胞：促炎劑刺激后的小鼠腹腔巨嗟細胞（單 元 6.1) 2 4 孔 平 底 細胞培養板（Costar) 1 . 設置實驗組和對照組（見基本方案步驟 1)，在 2 4 孔板中每孔加入 0.5m l 細胞懸液。 2 . 置 37°C ， 5 % C 〇 2 細胞培養箱中培養 I h 使巨噬細胞貼壁。 3 . 棄上清后，沿孔壁緩慢加入 Iml D E M E M - I O 培養基，避免破壞貼壁細胞層。重復洗滌 2 次 ，最后加入 0.5 ml D E M E M - I O 培養基。 4 . 致敏及激活巨噬細胞，參見基本方案步驟 2 和 4 。 展開 |
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