實驗方法原理 通過光鏡觀察細胞形態、電鏡觀察超微結構及檢測培養上清白蛋白水平證實培養細胞為肝細胞，持續培養結果顯示原代培養第6～12 d 左右為肝細胞功能最佳觀察和實驗階段。
實驗材料 小鼠
試劑、試劑盒 DMEMDMEM胰酶PBS
儀器、耗材 飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研磨玻片濾網離心管6 孔培養板吸管移液管手套微量加樣器
實驗步驟
一、實驗步驟
1. 將小鼠斷頸致死，置 75%酒精泡2-3 秒鐘，取肝臟，置于盛有 PBS 的平皿中。
2. 剔除脂肪、結締組織、血液等雜物，轉移到另一個盛有 PBS 液的平皿中。
3. 用手術剪將臟器剪成小塊(大小約 1mm2)，玻片研磨，轉到離心管，離心(1000 rpm，5 min)。
4. 視組織或細胞量加額加入5-6 倍(3-5 ml)胰酶，37℃中消化 20 分鐘，每隔 5 分鐘振蕩一次，或用吸 管吹打一次，使細胞分離。
5. 加入3-5 ml 含血清的培養液以中止胰酶消化作用。
6. 用100 目孔徑濾網濾過，除去未消化的大組織塊。
7. 再次離心5 min，棄上清液。
8. 加入無血清培養液5 ml，沖散細胞，再離心一次，棄上清液。
9. 加入含血清的培養液 l-2 ml (視細胞量)，血球計數板計數。
10. 將細胞調整到5×105/ml 左右，轉移至6 孔培養板中，37℃下培養。