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  • 發布時間:2019-04-25 14:43 原文鏈接: 小鼠的飼養與管理

      小鼠(Mouse. Mus. musculus)屬哺乳綱(Mammalia)、嚙齒目(Rodentia)、鼠科(Muridae)、小鼠屬(Mus)。小鼠來源于野生鼷鼠,從17世紀開始用于解剖學研究及動物實驗,經長期人工飼養選擇培育,已育成多達千余個獨立的遠交群和近交系,分布遍及世界各地。由于小鼠繁殖快,飼養管理費用低,所以成為生物醫學研究中廣泛使用的實驗動物,也是當今世界上研究最詳盡的哺乳類實驗動物。

     

                        第一節  生物學特性

     

        一、行為和習性

        1. 小鼠膽小,易于受驚,對外界環境的改變反應敏感。受驚時,尾巴挺直并猛力甩動,如強光或噪聲刺激可導致哺乳母鼠神經紊亂,發生食仔現象。

        2. 小鼠在人工馴養條件下,性情溫順易于捕捉,一旦逃出籠外過夜則恢復野性,行動敏捷難以捕捉。

        3. 小鼠喜歡陰暗,固定一處睡眠營巢。傍晚活動加強,夜間更加活躍, 其進食、交配、分娩多發生在夜間。

        4. 小鼠是典型的嚙齒動物,門齒終生生長。因此小鼠有啃咬習慣, 以此來磨損門齒并保持其長短的恒定。

        5. 小鼠為群居動物,當群飼時,其飼料消耗量比單個飼養時多,生長發育也快。

        6. 小鼠群體中性成熟的雄鼠放在一起易發生互斗。 源于一窩的雄鼠或斷奶后同籠飼養的雄鼠間則較少攻擊。外來雄鼠常招致幾只雄鼠的集體攻擊。群居優勢在雄性很明顯,表現為群體中處于優勢者保留胡須,被稱為“理發師”,而處于劣勢者胡須被拔光。這一現象應與因寄生蟲性或真菌性皮炎所致的掉毛相區別。

        雄鼠具有分泌醋酸胺臭氣的特性,是小鼠飼養室內特異臭氣的主要原因。

        7. 小鼠對外界溫度的變化特別是低溫非常敏感,由于運輸、 環境改變而致低溫可很快引起小鼠死亡。

        二、解剖學特點

        1. 外觀

        小鼠體形小,90日齡的昆明種小鼠體長為90~110mm,體重為35~55g 。 近交系如615小鼠體長為85~94mm,體重為24~35g。一般雄鼠大于雌鼠。

        嘴尖,頭呈錐體形,嘴臉前部兩側有觸須,耳聳立呈半圓形。

        尾長約與體長相等,成年鼠尾長約150mm。尾有四條明顯的血管,背腹面各有一條靜脈,兩側各有一條動脈。尾有平衡、散熱和自衛等功能。

        被毛顏色有白色、野生色、黑色、肉桂色、褐色、白斑等。健康小鼠被毛光滑緊貼體表,四肢勻稱,眼睛亮而有神。

        2. 骨骼系統

        小鼠上下頜各有兩個門齒和六個臼齒,齒式為2(1003/1003)=16。門齒終生不斷生長。下頜骨喙狀突較小,髁狀突發達,其形態有品系特征,可采用下頜骨形態分析技術進行近交系小鼠遺傳質量的監測。

        小鼠的脊椎由55~61個脊椎骨組成,包括頸椎7個、胸椎12~14個、腰椎5~6 個、薦椎4個、尾椎27~30個。肋骨有12~14對,其中7對與胸骨接連,其它5~7對呈游離狀態,胸骨6塊。前肢由肩胛骨、鎖骨、肱骨(上腕骨)、橈骨、尺骨、腕骨和指骨組成。后肢由髖骨、大腿骨、脛骨、腓骨、跗骨、趾骨組成。

        小鼠骨髓為紅髓,終身造血。

        3. 內部臟器

        胸腔內有氣管、肺、心臟和胸腺,心尖位于第4肋間。肺由4葉組成。

        腹腔內有肝臟、膽囊、胃、腸、腎、膀胱、脾等器官。

        小鼠為雜食動物。食道細長約2cm,胃分前胃和腺胃,有嵴分隔,前胃為食管的延伸膨大部分。胃容量小(1.0~1.5ml),功能較差,不耐饑餓。與豚鼠、家兔等草食性動物相比,腸道較短,盲腸不發達,腸內能合成維生素C。有膽囊。胰腺分散在十二指腸、胃底及脾門處,色淡紅,不規則,似脂肪組織。肝臟是腹腔內最大的臟器,分左、右、中、尾四葉組成,具有分泌膽汁,調節血糖,貯存肝糖和血液,形成尿素,中和有毒物質等功能。

        4. 淋巴系統

        淋巴系統很發達,包括淋巴管、淋巴結、胸腺、脾臟、外周淋巴結以及腸道派伊爾氏淋巴集結。性成熟時胸腺最大。脾臟可貯存血液并含有造血細胞,包括巨核細胞、原始造血細胞等,這些造血細胞組成造血灶,有造血功能。雄鼠脾臟明顯大于雌鼠。小鼠沒有腭或咽扁桃體。外來刺激可使淋巴系統增生。

        5. 生殖系統

        雌鼠的生殖器官有卵巢、輸卵管、子宮、陰道、陰蒂腺、乳腺等。雌性子宮呈 "Y"型,分為子宮角、子宮體、子宮頸。卵巢為系膜包繞,不與腹腔相通,故無宮外孕。陰蒂腺在陰蒂處開口,左右各一。陰道在出生時關閉,從斷奶后至性成熟才慢慢張開。乳腺發達,共有5對,3對位于胸部,可延伸至頸部和背部;腹部有2對,延續到鼠蹊部、會陰部和腹部兩側,并與胸部乳腺相連。

        雄鼠的生殖器官有睪丸、附睪、儲精囊、副性腺(凝固腺、前列腺、尿道球腺、包皮腺)、輸精管及陰莖等。雄性為雙睪丸,幼年時藏存于腹腔內,性成熟后則下降到陰囊,其表面為纖維結締組織,內部有許多曲細精管和間質組織所組成。精子在通過附睪期間成熟,并與副性腺分泌物一同在交配時射入雌鼠陰道內。前列腺分背、腹兩葉。凝固腺附著于精液腺內側,是呈半透明的半月形器官。副性腺分泌物有營養精子、形成陰道栓等作用。

        三、生理學特性

        1. 生長發育

        小鼠生長發育的快慢與品系、營養狀況、健康狀況、環境條件、母鼠哺乳只數和哺乳能力以及生產胎次均有密切關系。

        小鼠卵在輸卵管壺腹部受精后開始分裂發育,至桑椹胚(約3天)進入子宮,形成囊胚(約第5 天)開始著床,妊娠期為19~21天。

        胎兒產出后母鼠撕破羊膜,咬斷臍帶,吃掉胎盤。新生小鼠赤裸無毛,皮膚肉紅色,不開眼,雙耳與皮膚粘連。初生小鼠即可發聲,嗅覺和味覺敏感。3日齡仔鼠臍帶脫落,皮膚由紅轉為白色,開始長毛并出現胡須,有色品系仔鼠可看出毛色。4~6日齡雙耳張開聳立。7~8日齡四肢發育開始爬動游走,被毛逐漸濃密,下門齒長出。9~10 日齡有聽覺,被毛長齊。12~14日齡睜眼,長出上門齒,開始采食及飲水。3 周齡可離乳獨立生活。4周齡,雌鼠陰腔張開。5周齡,雄鼠睪丸降落至陰囊,開始生成精子。60日齡體成熟。健康小鼠壽命可達18~24個月,最長可達3年。近交系小鼠與普通小鼠相比,一般生活能力弱,壽命較短。

        就動物體重與年齡(日齡或周齡)的相關關系可以畫出動物的生長曲線。也可按體重和年齡數據列出其體重增長情況表。生長曲線和體重增長情況表是動物飼養管理和健康狀況多種因素綜合性評價的重要指標。一般雄鼠比雌鼠體重增長快。普通小鼠比近交系小鼠生長快。(見表1)

                                                     

                       表1  不同周齡小鼠體重的增長情況

       ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

       品(種)系     昆明小鼠           615小鼠          C3H小鼠     

                  ────────────────────────

       周 齡      ♂       ♀        ♂      ♀        ♂      ♀

       ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

        初生     1.90     1.70      1.58    1.58      1.44    1.44  

         1       6.40     5.70      4.64    4.64      4.40    4.40  

         2       9.77     8.35      7.96    7.96      7.00    7.00  

         3      12.70    12.50      9.83    9.83      9.70    9.70  

         4      20.00    17.50     19.00   15.75     13.30   12.10  

         5      29.50    24.00     22.58   20.75     17.20   15.20  

         6      32.50    28.50     25.96   21.88     20.00   17.80  

         7      36.00    30.00     27.96   23.12     21.20   18.00  

         8      38.00    33.00     28.83   24.16     22.30   19.27  

         9      40.00    34.00     28.88   24.80     25.30   20.85  

        10      41.00    35.00     29.79   25.28     25.80   22.10  

       ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

     

        2. 體溫與水的調節 

        小鼠的體溫調節因日齡的增長而不同。新生小鼠在40日齡前其體溫是被動調節的,特別是新生乳鼠,在被毛長齊以前,主要依靠母鼠維持體溫。40日齡后,體溫自動調節,正常情況下保持恒定。

        小鼠體表面積相對較大,環境溫度的波動常可引起小鼠發生明顯的生理學反應。小鼠對寒冷的應答反應為不發抖產熱作用。寒冷靜態下小鼠產生的熱量相當于基礎代謝率的3倍,比任何其它動物的變化都大。小鼠汗腺不發達,不能加大喘氣,唾液分泌能力有限。在運輸途中或實驗室內如環境溫度升高則以體溫升高,代謝率下降以及耳血管擴張來加快散熱。

        外界溫度變化太大,可很快使小鼠喪失體溫的恒定性。低溫能造成小鼠繁殖力下降,抗病力下降,短時間內可導致小鼠死亡。持續高溫(32℃以上)也常常引起小鼠死亡。研究發現小鼠在21~25℃環境溫度區內生長較快,產仔多,活力強。

        小鼠可通過呼出的氣體在鼻腔內冷卻以及尿液的高度濃縮來保持水分。與大多數哺乳動物相比小鼠對飲水量不足更為敏感,因為小鼠水分代謝的半衰期僅為1.1天,比大的哺乳動物要快得多,因此,對小鼠需要供給充足的飲水。小鼠飲水量為4~7ml/天。環境溫度、濕度變化太大時,都會影響小鼠健康,而發生疾病。

        3. 正常生理生化常數

       (1)一般生理值

        體重:近交系成年小鼠24~35g;昆明成年小鼠35~55g

        壽命:2~3年

        妊娠期:19~21天

        性周期:4~5天

        心率:600(328~780)次/分

        呼吸量:0.09~0.23ml/次

        飲水要求量:4~7ml/只/天

        排尿量:1~3ml/天

        體成熟:60~90天             

        哺乳期:18~23天             

        體溫:37.5~38.8℃           

        呼吸數:163(84~230)次/分 

        飼料要求量:3~7g/只/天

        排便量:1.4~2.8g/天       

       (2)血液指數

        血壓:95~125/67~90mmHg

        總血量:7.78(4.9~12.1)ml/100g體重

        紅細胞:9.3(7.7~12.5)×106/mm3血

        紅細胞壓積:41.5ml/dl血

        血紅蛋白濃度:14.8(10~19)g/dl血,32(30~35)g/dl紅細胞

        白細胞:8.0(4.0~12.0)千/mm3血

        嗜中性白細胞:25.5(12~44)%,2.0(0.7~4.0)千/mm3血

        嗜酸性白細胞:2(0~5)%,0.15(0~0.5)千/mm3血

        嗜堿性白細胞:0.5(0~1)%,0.05(0~0.1)千/mm3血

        單核細胞:4(0~15)%,0.3(0~1.3)千/mm3血

        淋巴細胞:68(54~85)%,5.5(3~8.5)千/mm3血

        血小板:157~260千/mm3血

       (3)血液生化指標

        血漿總蛋白:5.5(5.2~5.7)g/dl

        白蛋白:3.2(2.8~3.9)g/dl

        球蛋白:3.8(3.5~4.1)g/dl

        鈣:9.8~10.6mg/dl

        鈉:335~370mg/dl

        清蛋白:1.6~1.7g/dl

        全血糖:147~171mg/dl

        鉀:30~31mg/dl

        四、生殖生理

        1. 性成熟

        小鼠性成熟早,5周齡雄鼠睪丸出現精子,45~60日齡性發育成熟。雌鼠20 日齡后陰道皮膚逐漸變薄,陰道開口,其陰道開口與卵巢機能活動相一致。一般雌鼠36~50日齡,具有生殖能力。小鼠的性成熟因品系和飼養條件不同而有所差異。

        2. 發情

        雌鼠性成熟后,象其它哺乳動物一樣,卵巢間斷而周期性的產生卵細胞并分泌雌性激素,包括卵細胞上皮細胞分泌的雌激素和黃體細胞分泌的孕激素。在激素的作用下雌鼠出現明顯的動情周期稱為性周期。雌鼠全年多次發情,性周期4~5天。

        性周期可分為動情前期,發情期,動情后期,動情間期(休情期)4個階段。每個階段的陰道粘膜可發生典型變化。根據陰道涂片所觀察到的陰道上皮細胞變化,可進一步推測卵巢、子宮功能的周期性變化及激素變化和所處的發情階段。如在發情期可觀察到大量的角化上皮細胞集聚在一起;而在發情間期可觀察到散在的白細胞、有核上皮細胞、少量角化上皮細胞及少量粘液。

        3. 交配

        小鼠體成熟一般多為60~90天,是適宜的配種日齡。一般發情后2~3小時即可排卵,排卵期3~4天,但在排卵期僅數小時內才允許公鼠交配。

        雌鼠交配后,在陰道口形成一個白色的陰道栓,是公鼠的精液、母鼠的陰道分泌物和陰道上皮混合遇空氣后變硬的結果,可防止精子倒流,提高受孕率。陰道栓常視為交配成功的標志。陰道栓在交配后12~24小時自動脫落。

        雌鼠產后12~24小時可發情,此時交配可造成產后妊娠(邊哺乳邊懷孕)。有時,由于延遲著床,此妊娠期要比一般妊娠期長,可達31~35天。此外雌鼠與不育雄鼠交配或用機械方法刺激宮頸可產生假性妊娠(pseudopregnancy),一般可維持10~12 天,有時長達3周。

        4. 妊娠

        妊娠期19~21天,妊娠期的長短與小鼠品系及個體、環境因素、排卵數量、受精卵種植率、胎次等有關。

        5. 分娩

        小鼠的分娩多在夜間進行。產前不安,不停地整理產窩,約4分鐘產仔一只,1分鐘后胎盤產出,母鼠將胎盤嚼食。整個過程約經1小時。有時可出現因受精卵種植延遲導致的產后3~5天又產仔的現象。

        小鼠每胎產仔6~15只,產仔數取決于品系、胎次、飼養條件、營養條件等。第2~6胎產仔數較多,一般7胎后產仔數逐漸下降。

        6. 哺乳

        哺乳期18~23天,小鼠帶仔數一般為8~10只,因母鼠營養狀況、體質狀況、 生產能力等因素的不同而變化。母鼠哺乳仔數太多可導致仔鼠發育不均。如帶仔數不足時可將其它多余的同齡仔鼠放入寄奶代乳,但放入前應使其感染新窩的氣味,以免被代乳母鼠咬死。留種仔鼠可適當延長哺乳期到23天。

        7. 繁殖時限

        小鼠性活動可維持1年左右,作為種鼠使用時間一般為6~8個月,之后其繁殖能力下降,仔鼠質量越來越差,因此應予淘汰。近交系小鼠一般連續生產5~6胎,即可淘汰。

        五、遺傳學特性

        小鼠共有20對染色體(2n=40),已培育成許多近交系。

        小鼠是遺傳學研究中最常用的哺乳類實驗動物之一,也是目前遺傳學背景知識研究得最詳盡的動物之一,研究最為充分的是組織相容性復合體,毛色基因等。毛色基因是識別品系的最簡易的標志。小鼠毛色由五個主要的基因位點所決定即Aa、Bb、Cc、Dd、Ss。小鼠的組織相容性復合體(H)調控著細胞表面分子的表達,調節主要免疫功能,其中H2位點位于第17條染色體上,是決定異體排斥的位點。它可以作為小鼠遺傳檢測的指標,也是排斥異體組織抗原的主要成分。

      第二節  小鼠的主要用途

     

        小鼠在科學研究中的使用數量是首屈一指的。小鼠在生物學、醫學、農業、化工、畜牧獸醫等學科的科學研究中都有非常重要的作用。尤其在生命科學研究中其應用范圍遍及各個領域如生殖生理、腫瘤、毒理、藥理、免疫和微生物的研究工作以及藥品、生物制品的制造和檢定工作。其主要用途有以下幾方面:

        一、遺傳學和遺傳性疾病的研究

        由于小鼠生長繁殖周期短,已培育成許多近交系及突變系,對遺傳學研究提供了十分方便的條件。

       小鼠的毛色基因已研究得比較清楚, 因此毛色常作為小鼠遺傳學分析中的遺傳標記和品系鑒定的依據之一。具有遺傳性疾病的突變系為研究人類遺傳性疾病的病因、發病機理和治療,提供了自然的模型動物。如家族性肥胖、白化病、全身性紅斑狼瘡、侏儒癥等都有相應的突變系小鼠可供研究使用。

        轉基因小鼠可用于研究基因的功能、表達和調節,探索疾病的分子遺傳學基礎和基因治療的可能性和方法。

        小鼠品系多,并存在遺傳上相關的許多同源近交系,重組近交系等。重組近交系小鼠是將雙親品系的基因自由組合和重組產生一系列的子系,這些子系是小鼠遺傳學分析的重要工具,主要用于研究基因定位及其連鎖關系。同源近交系小鼠常用來研究多態性基因位點的多效性,基因的效應和功能以及發現新的等位基因。

        二、腫瘤學研究

        由于小鼠有許多近交系,部分近交系有其特定的自發性腫瘤,可利用其自發腫瘤與人體腫瘤的相似之處做為動物模型進行腫瘤發生、發展和治療的研究。同時,胸腺嚴重缺陷的裸小鼠可接受人類各種腫瘤細胞的植入,成為活的癌瘤細胞“試管”,是研究人類腫瘤生長發育、轉移和治療的絕佳動物。目前,小鼠已成為腫瘤研究中的主要動物,用于原病毒基因組學說和癌基因假說的研究。AKR小鼠白血病被證明是遺傳因素影響下,有病毒誘發的傳染病。

        三、傳染性疾病的研究

        小鼠對多種微生物易感,如沙門氏菌、日本血吸蟲病、脊髓灰質炎和鉤端螺旋體等,常用小鼠感染誘發出類似于人類的傳染性疾病,而制造出相應的動物模型,從而對病原體的致病力,宿主抵抗的機理、病理和治療進行研究。如,麻風是由麻風桿菌引起的傳染病,皮膚、鼻和上呼吸道以及外周神經均有病變,神經受累常可造成手足殘廢和面部毀形。將麻風桿菌接種于免疫功能低下(去胸腺加全身X 光照射)小鼠的足墊或耳部,可造成此病的動物模型,用以研究麻風桿菌的生物學性狀和評價抗麻風藥物的藥效等。

        四、藥物研究

        小鼠常用于藥物安全性評價、治療效果評價、效價測定及生物制品檢定。小鼠特別適合于藥物急性毒性實驗,測定藥物或化學制劑的半數致死量(LD50)和藥物致癌性試驗。小鼠廣泛用于血清、疫苗等生物制品的檢定。還可用小鼠熱板技術引起的后爪運動或機械壓尾評價止痛藥。

        五、免疫學研究

        利用免疫功能缺陷的小鼠進行免疫機制的研究。80年代培育出的Scid小鼠是一種先天性T和B細胞聯合免疫缺陷的突變系動物,可用于研究LAK細胞、巨噬細胞等自然防御細胞和免疫輔助細胞的分化和功能。

        使用BALB/c、AKR、C57BL等小鼠免疫后的脾細胞與骨髓瘤細胞融合, 進行單克隆抗體的制備和研究。單克隆抗體廣泛用于疾病診斷、治療和分子生物學研究。

        六、內分泌疾病的研究

        小鼠自發或誘發的內分泌腺結構的缺陷常引起類似人類的內分泌疾病,是內分泌研究領域的很好的動物模型。如胰島發育不全造成的肥胖癥;垂體性侏儒癥以及生長激素缺乏造成的侏儒癥。

        七、老年學研究

        由于小鼠壽命短,常用于研究衰老的起因和機理。如,用老年C57BL/6J 雄性小鼠研究表明,鼠腦紋狀體多巴胺含量降低,酪氨酸轉化率下降,一些物質在下丘腦和紋狀體中分解代謝減慢等。垂體功能低下,生長激素缺乏的侏儒小鼠,其壽命只有4.5個月,且表現為灰發,皮膚萎縮,雙眼白內障,H3~胸腺嘧啶吸收率低,說明生長激素與老化有關。

        八、其它

        小鼠還用于其它許多方面的研究,如計劃生育、物理損傷性疾病、營養學、悉生學等。

         另外,燒傷、凍傷、放射病、肝硬化、胰腺炎等疾病均可用小鼠復制。

     

                       

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