1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備
國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法（HPLC）分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性（反相）和電荷（離子交換）方面的差別來實現樣品的分離的。反相HPLC的優點是分辨率大。利用分子生物學方法表達出的重組人海藻糖酶經聚丙烯酰胺凝膠電泳分離純化后也可以作為一種免疫原。
2. 抗海藻糖酶單克隆抗體的制備
通過腹腔注射加佐劑的重組蛋白或合成的多肽來免疫8周齡的雌性小鼠BALB/c，第一次免疫問隔兩周后，每周連續注射3-4次。最后一次注射后3-4天殺死小鼠，用改良的Kohler和Milstein方法將脾細胞與B細胞瘤株P3-X63-Ag8融合。細胞融合產生8種雜交瘤克隆株：KM2275、KM2276、KM2285-2290，單克隆抗體KM2275和KM2276是由重組海藻糖酶免疫產生的抗體，其他抗體是由合成多肽免疫產生的。抗體KM2275和KM2287與重組海藻糖酶和尿液中的海藻糖酶均有良好反應。
3. 夾心ELISA方法的建立
用單克隆抗體KM2287包被ELISA反應板小孔，用生物素標記單克隆抗體KM2275，用HRP標記鏈霉親和索，采用生物素一親和素夾心酶免疫測定辦法；lshiharaR等測定了該方法的最適工作條件：尿液標本測定前需經凝膠過濾；尿液過濾后需用含1g/LSDS的PBS稀釋10倍；最適pH為6.0-8.0。當尿液貯存于-60℃、-30℃、或4℃30天，酶蛋白含量均未下降。可能影響的物質如維生素C（10g/L）、葡萄糖（100g/L）、白蛋白（10g/L）或肌酐（1g/L）均不影響該ELISA方法。