實驗方法原理 用無水乙醇沉淀尿中蛋白,獲得無蛋白尿濾液,再將其與焦性銻酸鉀作用生成焦性銻酸鈉沉淀。最后與標準管比較求得尿鈉的含量,其反應式如下:NaCl+K[Sb(OH)6]→Na[Sb(OH)6]+KCl
實驗材料 尿液
試劑、試劑盒 無水乙醇焦性銻酸鉀溶液氫氧化鉀 鈉標準液 氯化鈉
儀器、耗材 吸管架試管架離心管試管刻度吸管
實驗步驟
一、試劑配置
1. 2%焦性銻酸鉀溶液:稱取焦性銻酸鉀(A、R或C、P)10 g溶于蒸餾水500ml,再煮沸3~5 分鐘,用流水冷卻,加10%氫氧化鉀(A、R 或C、P)15 ml,過濾后保存于塑料瓶或用涂有蠟的棕色瓶中備用。
2. 鈉標準液(0.15 mg/鈉ml) 取氯化鈉(A.R.)置于110℃~120℃烤箱內15 小時以上,使其干燥。再稱取干燥氯化鈉0.3815 g用去離子水50 ml 溶解,再以無水乙醇加至1 000 ml,充分混合。
二、測定
取尿0.1 置離心管中,加入無水乙醇1.9 ml,用力振搖,靜置10 分鐘離心沉淀,取上清液按以下步驟操作
2. 上述操作完畢后混勻立即比色,用721 分光光度計在520 比色,以空白管調零,讀取標準管與測定管光密度,按下列公式計算:
鈉㎎/ml×30 分鐘尿量(ml)=總尿鈉(㎎)
注:0.025 表示測定液里含量(0.1 ml 尿加無水乙醇1.9 ml稀釋至2 ml,實際僅取0.5 ml 稀釋液,故為0.025)0.075 表示標準液里實際含鈉毫克數(1 ml=0.15 ㎎鈉,0.5 ml=0.075 ㎎鈉)。
注意事項
1. 加入無水乙醇應用力振搖,使沉淀快速形成以使蛋白沉淀顆粒均勻。
2. 操作完畢后立即比色,久置使顆粒變粗影響結果。