一、材料、儀器設備及試劑
1.材料
菠菜或其他綠色植物新鮮葉片。
2.儀器設備
研缽,刻度試管,漏斗,紗布,小燒杯,剪刀。
3.試劑
(1)0.1% 2,6-二氯酚靛酚, 石英砂。
(2) 提取用的緩沖液:內含0.05 M tris(三羥甲基氨基甲烷),pH7.5,0.4 M 蔗糖,0.01 M NaCl;
二、實驗步驟
1. 首先取冰放入不銹鋼盆中,然后裝入塑料袋里,再將預冷的研缽置于冰上。
2. 取12克新鮮菠菜葉,洗凈擦干,去中脈剪碎放入座在冰中的研缽里,加10 ml (預先冷凍的)提取液。
3. 迅速研磨破碎細胞(破碎一定要徹底),再用約10 ml 冷凍提取液混勻,得懸浮液。將懸浮液通過三層紗布,過濾到小燒杯中。
4. 濾液裝入一支離心管中,1000轉/分離心3-5分鐘(離心管一定要配平),將上清溶液裝入另一支離心管(盡量去除雜質,寧可損失一部分溶液,也不要將沉淀移入離心管),棄去沉淀(未破碎的細胞及組織殘渣)。即得到葉綠體懸浮液。
5. 取試管兩支,每支試管中加入葉綠體懸浮液5 ml 。
6. 加 0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液5-6滴,搖勻。將其中一支試管置于直射光下,另一支試管置于暗處,注意日光下的試管中溶液顏色變化。5-8 M in 后,將置于暗處的試管取出,比較兩試管溶液顏色變化,并解釋原因。 展 |