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  • 發布時間:2019-04-10 18:27 原文鏈接: 希爾反應的觀察實驗

    實驗方法原理希爾反應(Hill  reaction)是綠色植物的離體葉綠體在光下分解水,放出氧氣,同時還原電子受體的反應。氧化劑2,6-二氯酚靛酚是一種藍色染料,接受電子和H后被還原成無色,可以直接觀察顏色的變化,也可用分光光度計,還可以對還原量進行精確測定。
    實驗材料

    菠菜

    試劑、試劑盒

    2-6-二氯酚靛酚石英砂三羥甲基氨基甲烷蔗糖NaCl

    儀器、耗材

    研缽刻度試管漏斗紗布小燒杯剪刀

    實驗步驟

    一、材料、儀器設備及試劑

    1.材料

    菠菜或其他綠色植物新鮮葉片。

    2.儀器設備

    研缽,刻度試管,漏斗,紗布,小燒杯,剪刀。

    3.試劑

    (1)0.1% 2,6-二氯酚靛酚, 石英砂。

    (2) 提取用的緩沖液:內含0.05 M tris(三羥甲基氨基甲烷),pH7.5,0.4 M 蔗糖,0.01 M NaCl;

    二、實驗步驟

    1. 首先取冰放入不銹鋼盆中,然后裝入塑料袋里,再將預冷的研缽置于冰上。

    2. 取12克新鮮菠菜葉,洗凈擦干,去中脈剪碎放入座在冰中的研缽里,加10  ml (預先冷凍的)提取液。

    3. 迅速研磨破碎細胞(破碎一定要徹底),再用約10  ml 冷凍提取液混勻,得懸浮液。將懸浮液通過三層紗布,過濾到小燒杯中。

    4. 濾液裝入一支離心管中,1000轉/分離心3-5分鐘(離心管一定要配平),將上清溶液裝入另一支離心管(盡量去除雜質,寧可損失一部分溶液,也不要將沉淀移入離心管),棄去沉淀(未破碎的細胞及組織殘渣)。即得到葉綠體懸浮液。

    5. 取試管兩支,每支試管中加入葉綠體懸浮液5  ml 。

    6. 加 0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液5-6滴,搖勻。將其中一支試管置于直射光下,另一支試管置于暗處,注意日光下的試管中溶液顏色變化。5-8 M in 后,將置于暗處的試管取出,比較兩試管溶液顏色變化,并解釋原因。


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