探討抗MHC-Ⅱ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P對Daudi細胞表面MHC-Ⅱ類分子表達的抑制作用.
M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位.以pTK117質粒為模板,PCR擴增帶有抗CⅡTA第452及629位點的引導序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),再分別插入pUC19載體(pUC19-M1-452-GS 和 pUC19-M1-629-GS).從Raji細胞中克隆CⅡTA基因DNA片段(114～800)后插入pGEM-7zf(+)質粒.將重組M1-RNA與靶基因的mRNA進行細胞外共孵育,顯示僅pUC19-M1-629-GS可特異性地切割靶基因mRNA.再將M1-629-GS克隆入psNAV載體(pA629)并穩定轉染Daudi細胞株,RT-PCR檢測其CⅡTA的mRNA水平,流式細胞術檢測其HLA-DR、DP、DQ抗原表達.與對照組比較,M1-629-GS陽性Daudi細胞的CⅡTA mRNA含量減少90.19﹪(P≤0.05),其HLA-DR、DP、DQ抗原表達分別降低91.97﹪、90.19﹪、92.36﹪(P≤0.05).
研究表明,抗CⅡTA的核糖核酸酶P可通過抑制CⅡTA的轉錄而降低Daudi細胞表面的MHC-Ⅱ類分子的表達.