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  • 發布時間:2019-05-23 22:30 原文鏈接: 庚型肝炎病毒抗體檢測操作規程

    庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布,與人類急性和(或)慢性肝炎有關。主要以血液途徑傳播,如輸血及血制品、靜脈吸毒、使用污染的注射器、經常接觸血源等。HGV為單股正鏈RNA病毒,基因組全長9 392個核苷酸。基因結構分為:5’非編碼區、編碼區(結構區和非結構區)、3’非編碼區,結構區編碼核心蛋白和包膜蛋白,非結構區有NSl、NS2、NS3、NS4、NSs等5個區,其中NS2編碼蛋白酶。庚型肝炎病毒(HGV)實驗室檢測指標主要為HGVAb-IgG。 
     
    [測定方法]  ELISA法
     
    [方法學原理]  庚型肝炎病毒(HGV)特異性抗原預包被于微孔板條上,樣品加入已有樣品稀釋液的反應孔中,在隨后的溫育過程中,若樣品中含特異性抗體(HGVAb—IgG),則該抗體與包被抗原形成抗原—抗體復合物被吸附到微孔板上,再加入酶標記的第2抗體,最終形成抗原—抗體—酶標記第2抗體復合物,洗滌除去未結合的游離酶,加入顯色劑后顯色。反之,若樣品中不含特異性抗體(HGVAb-IgG),則加入顯色劑后不顯色。
     
    [標本準備]  靜脈抽血2ml,不抗凝。
     
    [試劑]
     
    1.包被反應板
     
    2.樣品稀釋液
     
    3.陰性對照
     
    4.陽性對照
     
    5.洗滌劑
     
    6.酶標記第2抗體
     
    7.顯色劑A、B
     
    8.終止液
     
    [儀器設備]  酶標儀或全自動酶聯免疫檢測儀。
     
    [測定步驟]
     
    1.用加樣器在微孔反應條中加入樣品稀釋液,每孔100ul。
     
    2.將待測標本各l0ul分別加人已有樣品稀釋液的各孔中,直接加陰性對照、陽性對照各100u1,設空白對照1孔。
     
    3.充分混勻,37℃環境中溫育20min。
     
    4.傾去內容物,用洗滌液洗板5次,確保每次吸凈無殘留,全部洗完后在吸水紙上用力拍干。
     
    5.各孔加入酶標記第2抗體100fA,振蕩混勻。
     
    6.傾去

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