一、目的與要求:
1. 學習食品中粗脂肪測定的意義和原理。
2. 掌握索氏提取法測定脂肪的基本操作。
二、原理:
本法為重量法。將經前處理的樣品浸于無水乙醚或石油醚(沸程為30℃至60℃)中,借助于索氏提取器進行循環回流抽提。使樣品中的脂肪進入溶劑中,蒸去溶劑后所得到的殘留物即為脂肪。脂肪提出后進行稱量,該法適用于固體和液體樣品。
本法提取的脂肪性物質為脂肪類物質的混合物,除含有脂肪外還含有磷脂、色素、樹脂、固醇、芳香油等醚溶性物質,故稱為粗脂肪。
三、試劑及儀器:
SZF-06A脂肪測定儀(上海新嘉) 恒溫水浴鍋 烘箱
石油醚(A.R) 海砂 脫脂棉 脫脂濾紙 玻璃棒 棉線
固態樣品:不同品種馬鈴薯全粉[(早大白、克新、荷蘭薯、黃麻子),每組僅一種)]
四、操作步驟
1.濾紙筒的制備
將8cm×15cm的濾紙,用直徑約2cm的試管為模型,將濾紙以試管壁為基礎,疊折成底端封口的濾紙筒,筒內底部放一小片脫脂棉。在105℃烘箱中烘干至恒重,置于干燥器中備用。
2.樣品的準備
精密稱取自己組的馬鈴薯全粉2g,全部置入濾紙筒內(筒底墊一層脫脂棉)。并用脫脂棉蘸少量石油醚揩凈稱量用硫酸紙上的殘余試樣,一并無損地置入濾紙筒內,最后再用此脫脂棉塞嚴濾紙筒上面,壓住試樣,將濾紙筒上端折疊封嚴。
將濾紙筒放入索氏提取器的提取管內,注意勿使濾紙筒高于提取管的虹吸部分。
3.抽提
3.1連接裝置:將洗凈并在105℃烘箱內烘干至恒重的脂肪接收瓶,加石油醚達其容積的1/2-2/3(約80mL),然后將提取器各部分連接,注意不能漏氣。上部套入各冷凝管中,將連接好的裝置降至水浴鍋各加熱孔內。活塞呈豎直位。
注意:加熱提取時,應在電熱恒溫水浴中進行,也可以使用燈泡或電爐加熱的水浴鍋,嚴禁用火焰或電爐直接加熱索氏提取器。
3.2 抽提:先開冷凝水,再開SZF-06A脂肪測定儀的電源開關,防止空燒損壞電加熱器。調好溫度及時間。提取時間視樣品的性質而定,一般需6-12h。
加熱時接收瓶中石油醚蒸發,經冷卻后滴入抽提管中。樣品浸于石油醚中,粗脂肪被抽提,當液面超過虹吸管最高點后,溶有脂肪的石油醚經虹吸管流入接收瓶,如此循環抽提。注意水浴溫度不可過高,以醚液每小時循環6-12次為宜。樣品中脂肪是否抽提完全,可以用濾紙來粗略判斷:從提取管內吸取少量的石油醚醚并滴在干凈的濾紙上,待醚干后,濾紙上不留有半點油脂表明已經提取完全。
3.3回收醚:抽提結束后,旋轉活塞至水平位,再關閉電源開關,儀器自動進行石油醚回收。待接收瓶中石油醚回收剩2mL左右,取下接收瓶停止回收。此時關閉冷凝水。