ARN的診斷主要根據典型的臨床表現、實驗室及輔助檢查。一般而言，對患者進行認真的眼部檢查，特別是用間接檢眼鏡或三面鏡檢查，診斷并不困難，但對于臨床上可疑的患者，應進行一些必要的實驗室檢查：
1.房水和玻璃體抗體檢測
利用免疫熒光技術可進行特異性抗體檢測，如發現眼內有特異性抗皰疹病毒抗體產生，則對診斷有幫助。血清特異性抗體檢測對診斷也有一定的幫助。
2.活組織病理學檢查
屬于侵入性檢查。此病臨床變異較大，對一些可疑患者可行診斷性玻璃體切除和（或）視網膜活組織檢查，所得標本可用于病毒培養、組織學和免疫組織化學檢查、PCR檢測、原位雜交等。標本培養結果陽性、組織學檢查發現病毒包涵體以及電鏡觀察到病毒顆粒，對診斷有重要幫助。
此外，還應根據患者的具體情況選擇性地進行血清血管緊張素轉化酶、弓形蟲抗體等方面的檢測和檢查。
（1）熒光素眼底血管造影檢查 熒光素眼底血管造影檢查對確定患者中心視力喪失的原因、感染的范圍等方面是非常有用的。
（2）吲哚青綠血管造影檢查 急性視網膜壞死綜合征也可引起脈絡膜的改變，吲哚青綠血管造影檢查可發現以下病變：①脈絡膜血管擴張；②脈絡膜血管通透性增強所致的片狀強熒光；③弱熒光黑斑。
（3）其他輔助檢查 在玻璃體炎明顯影響眼底可見度時，超聲波檢查對確定有無視網膜脫離是非常有用的輔助檢查方法，它對于發現由視神經炎所致的視神經鞘擴大也是很有幫助的。活動性炎癥期視網膜電流圖（ERG）檢查可以發現a、b波降低，伴有或不伴有振蕩電位降低，視網膜電流圖的改變直接與受累組織的范圍、受累的嚴重性有關。嚴重的暴發型ARN早期檢查即可見閃光ERG熄滅。
CT掃描可發現受累眼甚至未受累眼的視神經鞘擴大；磁共振曾發現患者出現視束、視交叉和外側膝狀體的改變，此結果提示感染可能是通過膠質細胞軸索傳播的。