培養物準備
1. 每種交配型都在裝有 100 ml 培養基的 1 L 培養瓶中接種 5 ml 最近轉接過的短期貯存的四膜蟲，用鋁箔或棉絮塞子蓋上培養瓶。
2. 30℃ 培養至對數后期，通常這一培養為靜止培養。在此條件下，細胞將在 24 小時內達到所需密度。
在 10 mmol/L Tris 中使細胞饑餓起始
3. 在 pH 7.4 的 10 mmol/L Tris 中低速離心洗滌沉淀細胞，棄上清，在 Tris 中輕懸細胞。低速離心，再棄上清。
4. 在 10 mmol/L Tris 中重懸每種交配型細胞，使終濃度為 2X105~2.5X105 細胞/ml。等分為 100 ml 倒入 1 L 的培養瓶中。確定保持交配型分離。
5. 用鋁箔或棉絮塞子蓋上培養瓶，30℃ 不振搖過夜培養。
細胞共刺激和配對形成
6. 輕微綜合相同交配型的細胞并檢測濃度。
7. 混合數量相等的相反交配型的細胞，在每個 1 L 培養瓶中等分裝入 50~80 ml，用鋁箔或棉絮塞子蓋上。
8. 應使細胞在 30℃ 靜止放置，直到達到所需生長期。
9. 至所需生長期，于 1500~2000 g 離心 5 分鐘收獲交配細胞。細胞核的形態、數量等對確定生長期是便利的特征。
10. 如配制分離的細胞核，在培養基中重懸細胞，濃度為 2X106 細胞/ml，-20℃ 冷凍貯存或直接使用。
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