在收集到生物材料之后，最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存，
則應以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時，將儲
存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，
以避免RNase 的作用。
1. 提取組織RNA 時，每50～100mg 組織用1ml Trizol 試劑對組織進行裂解；提
取細胞RNA 時，先離心沉淀細胞，每5-10 ╳106 個細胞加1ml Trizol 后，反
復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞；
2. 將上述組織或細胞的Trizol 裂解液轉入EP 管中,在室溫15~30C下放置5 分鐘；
3. 在上述EP 管中，按照每1ml TRIZOL 加0.2ml 氯仿的量加入氯仿，蓋上EP
管蓋子，在手中用力震蕩15 秒，在室溫下（15℃～30℃）放置2～3 分鐘后，
12000g（2℃～8℃）離心15 分鐘；
4. 取上層水相置于新EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.5ml 異丙醇的量加入異丙
醇，在室溫下（15℃～30℃）放置10 分鐘,12000g（2℃～8℃）離心10 分鐘；
5. 棄上清， 按照每1ml TRIZOL 加1ml 75%乙醇進行洗滌， 渦旋混合，
7500g（2℃～8℃）離心5 分鐘，棄上清；
6. 讓沉淀的RNA 在室溫下自然干燥；
7.
用Rnase-free water 溶解RNA 沉淀。