腫瘤細胞凋亡與癌癥的發生、發展、死亡密切相關,對藥物誘導的腫瘤細胞凋亡進行檢測,可以作為藥物篩選以及判定抗腫瘤藥物治療效果的依據,在腫瘤治療中發揮著重要作用。細胞色素c(Cyt c)是細胞凋亡早期信號的重要標志物,在癌細胞的凋亡進程中起到關鍵作用。通過監測細胞凋亡進程中Cyt c的釋放水平,有助于從細胞水平上了解相關疾病,并實現對抗癌藥物的初步評價。熒光成像技術在生物活性物質的實時-動態-可視化檢測等方面扮演著重要角色,被廣泛應用于生物、醫療、臨床診斷等諸多領域。然而,能夠精準識別細胞內Cyt c釋放水平的熒光成像分析方法目前還十分匱乏。

圖1. 腫瘤細胞內Cyt c的釋放與檢測原理示意圖
近日,在國家自然科學基金項目(編號:21475142, 21675164, 21650110454)、甘肅省自然科學基金項目(編號:1506RJDA281, 17JR5RA311)和中科院“一三五”重點培育項目的資助下,中國科學院蘭州化學物理研究所邱洪燈研究員帶領的“百人計劃”研究團隊,利用Cyt c對氮摻雜碳量子點(N-doped CDs)的熒光淬滅效應,建立了一種簡單、快速、靈敏的新型非標記Cyt c傳感器(圖1)。該探針可用于依托泊苷(市售抗癌藥物)作用下HepG 2細胞內Cyt c釋放含量的檢測與成像,并首次實現了斑馬魚體內Cyt c的成像分析。
在此基礎上,通過考察不同天然產物如紫草素(Shi)、藤黃酸(GA)、楊梅素(Myr)、二氫楊梅素(Dmy)和白皮杉醇(Pic)等作用后腫瘤細胞內Cyt c的釋放水平,實現了對系列抗腫瘤藥物先導分子的初步篩選(圖2)。該研究表明,Shi和GA對HepG 2細胞具有較強的抗腫瘤活性,有望在腫瘤治療中發揮作用。該研究工作為細胞凋亡早期信號的檢測與抗腫瘤藥物的篩選提供了新策略。相關工作發表在Nanoscale, 2018, 10, 5342-5349上。

圖2、不同天然產物作用下HepG 2細胞內Cyt c共聚焦顯微熒光成像分析
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