手性色譜柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光學活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。通過引入手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異,從而達到光學異構體拆分的目的。要實現手性識別,手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成,特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。由于這種作用力較微弱,因此需要仔細調節、優化流動相和溫度以達到最佳分離效果。。
在手性拆分中,溫度的影響是很顯著的。低溫增加手性識別能力,但可能引起色譜峰變寬而導致分離變差。因此確定手性分析方法過程中要考慮柱溫的影響,確定最優柱溫。
迄今為止,尚沒有一種類似十八烷基鍵合硅膠(ODS)柱的普遍適用的手性柱。不同化學性質的異構體不得不采用不同類型的手性柱,而市售的手性色譜柱通常價格昂貴,因此如何根據化合物的分子結構選擇適用的手性色譜柱是非常重要的。
根據手性固定相和溶劑的相互作用機制,Irving Wainer首次提出了手性色譜柱的分類體系:
第1類:通過氫鍵、π-π作用、偶級-偶級作用形成復合物。
第2類:既有類型1中的相互作用,又存在包埋復合物。此類手性色譜柱中典型的是由纖維素及其衍生物制成的手性色譜柱。
第3類:基于溶劑進入手性空穴形成包埋復合物。這類手性色譜柱中最典型的是由Armstrong教授開發的環糊精型手性柱[2],另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物,如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色譜柱也屬于此類。
第4類:基于形成非對映體的金屬絡合物,是由Davankov開發的手性分離技術,也稱為手性配位交換色譜(CLEC)。
第5類:蛋白質型手性色譜柱。手性分離是基于疏水相互作用和極性相互作用實現。
但由于市場上可選擇的手性色譜柱越來越多,此分類系統有時很難將一些手性柱歸納進去。因此參考Irving Wainer的分類方法,根據固定相的化學結構,將手性色譜柱分為以下幾種:
刷(Brush)型或稱為Prikle型
纖維素(Cellulose)型
環糊精(Cyclodextrin)型
大環抗生素(Macrocyclic antibiotics)型
蛋白質(Protein)型
配位交換(|Ligand exchange)型
冠醚(Crown ethers)型
冠醚類固定相用于分離一級胺,一級胺必須質子化方能達到分離。因此必須使用酸性流動相,如高氯酸。最常用的是冠醚類固定相是18-冠-6,已有商品化產品,由Daicel公司制造。無論(+)或(-)型均可達到有......
蛋白質型手性色譜柱屬于第5種類型。分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。已經有多種蛋白質用于此類手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白(α-AcidGlycoprotein,AGP),人血清白蛋白......
大環抗生素型手性色譜柱是最近發展起來的,通過將大環抗生素鍵合到硅膠上制成的新型手性色譜柱。大環抗生素型手性色譜柱的出現歸功于DanArmstrong的貢獻。此類色譜柱常用的大環抗生素主要由三種:利福霉......
手性配位交換色譜(ChiralLigandExchangeChromatography,CLEC)由Davankov發明,是通過形成光學活性的金屬絡合物而達到手性分離,屬于IrvingWainer分類......
環糊精是通過BacillusMacerans淀粉酶或環糊精糖基轉移酶水解淀粉得到的環型低聚糖。通過控制環糊精轉移酶的水解反應條件可得到不同尺寸的環糊精。市售的環糊精主要是α、β、γ三種類型,分別含6、......
纖維素型手性色譜柱的分離作用包括相互吸引的作用及形成包埋復合物。它們屬于Wainer分類中的第2種類型。市售的手性色譜柱為微晶三醋酸基、三安息香酸基、三苯基氨基酸鹽纖維素固定相。很多化合物可通過此類型......
刷型手性色譜柱的出現和發展源于BillPrikle及其同事的卓越工作。六十年代,BillPrikle將手性核磁共振中的成果運用到手性HPLC固定相研究中,通過不斷實踐,發明了應用范圍較廣、柱效很好的手......
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手性色譜柱使用手冊,希望對大家有用!講的是一系列手性色譜柱的材料,結構參數,使用時用的流動相以及日常維護等。......