掃描電鏡樣品制備程序? ?
一、固定：戊二醛-鋨酸雙固定法
?? 1．2.5%戊二醛（試劑1）固定4小時（或者過夜）
? 2．0.1M?磷酸緩沖液（試劑2）清洗3次，每次15-30分鐘
?3．1%鋨酸（試劑3）固定2-4小時? 4．0.1M?磷酸緩沖液（試劑2）清洗3次，每次15分鐘
? 二、脫水：乙醇系列
?? 1．30%乙醇?15－20分鐘?
2．50%乙醇?15－20分鐘?
3．70%乙醇?15－20分鐘?
4．80％乙醇?15－20分鐘?
5．90%乙醇?15－20分鐘?
6．95%乙醇?15－20分鐘?
7.100%乙醇?兩次?每次15-20分鐘??
三、置換：? 乙酸異戊酯2次，每次15分鐘（或過夜）。?
四、干燥：?臨界點干燥?
五、離子濺射金?
六、掃描電鏡觀察?
附注：試劑配置?? 試劑1：2.5%戊二醛? 取0.2M磷酸氫二鈉40.5mL（A液），0.2M磷酸二氫鈉9.5mL（B液），混合均勻（即0.2M磷酸鹽緩沖液?pH7.4），加入10mL濃度為25%的戊二醛，用超純水稀釋至100mL。?? 試劑2：0.1M?磷酸緩沖液?（pH?7.4）?A液：0.2M磷酸氫二鈉? 稱取3.561g?Na2HPO4.2H2O（或者5.365g?Na2HPO4.7H2O）;?或7.164g?Na2HPO4.12H2O)，溶于100mL雙蒸水中。?B液：0.2M磷酸二氫鈉? 稱取2.760g?NaH2PO4.H2O（或者3.121g?NaH2PO4.2H2O），溶于100mL雙蒸水中。?量取A液36.0mL,?B液14.0mL，混合均勻后用雙蒸水稀釋至100mL，得0.1M?磷酸緩沖液（pH?7.4）。?? 試劑3：1%鋨酸? 將2%的鋨酸溶液與0.1M磷酸鹽緩沖溶液（pH?7.4）等體積混合，得1%鋨酸。
?注意：該操作在通風櫥中進行。
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