構成抗原的條件：
一、異物性，又稱為異質性或異源性
正常情況下，自身組織或細胞對機體本身無免疫原性。而異種或異體物質，以及化學組成或結構發生改變的和由于某種因素而暴露的在胚胎期與免疫系統隔絕的自身物質則為良好的抗原。
二、理化性狀
大分子物質
抗原的免疫原性與其分子大小有直接關系：
1、免疫原性良好的物質分子量一般都在10000以上, 在一定條件下, 分子量越大, 免疫原性越強；
2、分子量小于5000的物質免疫原性較弱；
3、分子量小于1000的物質為半抗原, 沒有免疫原性。但與蛋白質載體結合后可獲得免疫原性；
抗原須為大分子物質的原因可能是：
1、抗原分子質量越大，表面特殊化學基團（抗原決定簇）就越多，因而就越能有效地刺激免疫細胞，產生免疫應答。
2、大分子抗原物質化學組成復雜、結構穩定，不易被破壞和清除，在體內停留時間較長，故可持續刺激免疫系統發生免疫應答。
一般來講, 分子量越小, 免疫原性越弱, 甚至失去免疫原性。因分子量越小的物質越傾向于誘導細胞免疫而缺乏誘導抗體形成的體液免疫的能力。
人工合成短肽鏈需與大分子載體連接才能激發機體的體液免疫和細胞免疫應答。
三、化學組成、分子結構
大分子物質有時也并非一定是良好的免疫原，如分子量 99787的明膠，但因其分子結構和空間構象簡單，為直鏈氨基酸、易降解而使其免疫原性很弱。
一般來說,分子結構和空間構象愈復雜的物質免疫原性愈強。如含芳香族氨基酸的蛋白質比含非芳香族氨基酸的蛋白質免疫原性強。
多糖分子的免疫原性則主要取決于單糖的數目和類型，并且結構復雜者免疫原性強。
如果用理化方法改變抗原的空間構象, 其原有的免疫原性也隨之消失。同一分子不同的光學異構體之間也有免疫原性的差異。
抗原分子并非所有的基團都作用一致, 決定其免疫活性的只是其中的一小部分抗原區域。
抗原決定簇(antigenic determinant)是指存在于抗原分子表面的能夠決定抗原特異性的特殊化學基團，是與抗體結合的位點。由于抗原決定簇通常位于抗原分子表面, 因而又稱為表位(epitope)
抗原決定簇是具有特殊立體構型和免疫活性的化學基團。
抗原決定簇決定著抗原的特異性, 即決定著抗原與抗體發生特異結合的能力。
抗原分子母體表面有不同的抗原決定簇，即具有不同的特異性, 而同一化學基團的不同異構體均可影響抗原的特異性。
功能性抗原決定簇和隱蔽的抗原決定簇
1、功能性抗原決定簇：
存在抗原分子表面，能被淋巴細胞識別，同時能與抗體特異性結合而發生免疫反應的抗原決定簇，稱為功能性決定簇。
2、隱蔽的抗原決定簇：隱藏在抗原分子內部的抗原決定簇
佐劑(Adjuvan)： 先于抗原或與抗原混合后同時注入動物體內，能非特異性地改變或增強機體對該抗原的特異性免疫應答，發揮輔助作用的一類物質。
佐劑作用：
保護抗原，延長其在體內的滯留時間，使抗原緩慢釋放；增強機體對該抗原的特異性免疫應答；增強免疫原性。
最常用的佐劑：
弗氏佐劑（Freund’s adjuvant）是用礦物油（石臘油）、乳化劑（羊毛脂）和殺死的結核分枝桿菌(卡介苗)組成的油包水乳化佐劑，這三種成分俱全的佐劑稱為弗氏完全佐劑，不含結核分枝桿菌的佐劑為弗氏不完全佐劑。
的1、一只兔子每次的免疫劑量：
細胞抗原不低于1x107 ；
可溶性抗原100ug-1mg(300-800ug)；
合成抗原為2mg（半抗原約為20-200ug）
2、免疫途徑、免疫次數和間隔時間：
選用皮內、皮下、肌肉、靜脈、腹腔或淋巴結內途徑進行免疫，一般完全抗原免疫3-4次，合成半抗原免疫6次以上，兩次免疫間隔時間一般為3周。
【一免】：抗原 300-500ul抗原（濃度為1ug/ul）+300-500ul福氏完全佐劑+適量青霉素和鏈霉素混合，充分乳化，兔子背腹部剪毛后皮下多點注射免疫；（免疫兩只兔子）
注：抗原完全溶解后搖勻再取樣；福氏完全佐劑需搖勻后吸取免疫前取少量血清，作陰性對照
【二免】：間隔3周，300ul-500ul抗原+300ul-500ul福氏不完全佐劑+適量青霉素和鏈霉素混合，充分乳化，兔子背腹部剪毛后皮下多點注射免疫；
【三免】：間隔3周，300ul抗原+300ul生理鹽水+適量青霉素和鏈霉素混合，二側腿部肌注免疫;
【四免】：間隔14天，300ul抗原+300ul生理鹽水+適量青霉素和鏈霉素混合，二側腿部肌注免疫；
【五免】：間隔14天，300ul抗原+300ul生理鹽水+適量青霉素和鏈霉素混合，二側腿部肌注免疫；
注：
① 每次免疫后取少量血清，用瓊脂擴散試驗或間接ELISA測定效價，一般瓊脂擴散效價達1：32或間接ELISA測定效價達1：500000時可殺兔取血；
② 末免后7-10天取血放與平皿中，置37℃放30分鐘，4 ℃ 放置3-4小時，待血塊收縮后，吸血清到離心管，5000rpm離心5分鐘，上清即為血清，1.5毫升的離心管分裝-20 ℃ 保存。
淋巴細胞雜交瘤技術與單克隆抗體
K?hler和Milstein在1975年建立了體外淋巴細胞雜交瘤技術，用人工的方法將產生特異性抗體的B細胞與骨髓瘤細胞融合，形成B細胞雜交瘤，這種雜交瘤細胞既具有骨髓瘤細胞無限繁殖的特性, 又具有B細胞分泌特異性抗體的能力, 由克隆化的B細胞雜交瘤所產生的抗體即為單克隆抗體
單克隆抗體制備原理
