堿性復紅染色法:(萋納Ziehl-Neelsen法)
一、實驗試劑:
1. 萋納石炭酸復紅溶液:
堿性復紅乙醇飽和溶液:10ml
5%石炭酸溶液: 90ml
2. 脫色劑:
濃鹽酸:3ml 95%乙醇:97ml
3. 復染液(呂弗勒美蘭液):
美蘭乙醇飽和溶液: 30ml
10%氫氧化鉀: 0.1ml
蒸餾水: 100ml
二、染色方法:
l. 涂片經火焰固定,加石碳酸復紅溶液,徐徐加熱至有蒸汽出現,切不可沸騰。染5min,水洗。
2. 加脫色劑,不時搖動玻片至無紅色脫落為止,水洗。
3. 加復染液,染0.5-Imin,水洗。
4. 干后鏡檢,分枝桿菌呈紅色,背景為蘭色。
石炭團品紅-硫酸美蘭染色法
染液:
第一液:石碳酸品紅溶液:取堿性品紅乙醇飽和液10ml加5%石碳酸水溶液90ml混合。
第二液:硫酸美蘭液:美蘭2g,溶于75ml水中,慢慢滴加濃硫酸25ml混合即成。
方法:涂片經火焰固定后,滴加第一液微熱染3min,水洗。再用第二液染約lmin,水洗。干后鏡檢。
結果:抗酸菌呈紅色,其他皆為蘭色。 |