一、方法和試劑
母液
1. 冰醋酸
2. 乙醇
3. 1 M NaOH(氫氧化鈉)
4. 100 ml 1 M K2HPO4(磷酸氫二鉀)
5. 100 ml 1 M KH2PO4(磷酸二氫鉀)
6. 苯胺藍(Fisher)
7. 甘油
工作溶液
1. 冰醋酸含量為10%的乙醇溶液(固定組織使用)
2. 50 mM 偏磷酸鉀溶液:4.17 ml 1 M 磷酸氫二鉀+0.83 ml 1 M 磷酸二氫鉀+995 ml 水,pH7.5
3. 苯胺藍含量為0.01%的KPO4溶液(染色)
4. 含有50%甘油的偏磷酸鉀溶液(封固劑)
二、儀器
1. 紫外顯微鏡
三、步驟
1. 在1.5 ml 離心管里加入250 μl 冰醋酸,將雄蕊浸泡到冰醋酸里至少固定1.5小時。如果需要可將組織過夜固定。
2. 將固定完的組織浸泡在1 M 氫氧化鈉溶液里過夜處理,是組織軟化。
3. 用偏磷酸鉀洗植物組織三次。(在這個階段植物組織是易碎的)
4. 用200 μl 苯胺藍對組織進行染色5-10分鐘或者最久可以染色10小時。
5. 染色后,將組織放置到載玻片上在紫外顯微鏡下觀察。如有需要可以壓片觀察。