革蘭染色為陰性，但不易著色，一般用Giemsa染色，染成淡紫色。支原體主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成絲狀后斷裂呈球桿狀顆粒。大部分支原體繁殖速度比細菌慢，適宜生長溫度為35℃，最適pH值為7.8～8.0。在固體培養基上培養，形成典型的“荷包蛋”狀菌落。支原體抵抗力較弱，對熱、干燥敏感，對75%乙醇、煤酚皂溶液敏感，對紅霉素、四環素、螺旋霉素、鏈霉素、卡那霉素等藥物敏感，但對青霉素類的抗生素不敏感。
