在臨床工作中，移植排斥反應是影響實體器官移植預后的主要因素。早期發現和診斷排斥反應，對于及時采取防治措施具有重要指導意義。排斥反應的臨床判斷主要依靠癥狀和體征、移植物功能狀態及實驗室檢測等綜合指標。因此，在實體移植排斥反應的早期能發現一些預警分子可能對實體器官移植的發展起著非常重要的作用。
實體器官移植的排斥反應：非創傷性檢測指標火熱進行
過去診斷移植排斥反應主要依靠創傷性的穿刺移植器官，例如心臟移植后進行心肌、心內膜穿刺活檢。隨著技術的不斷發展，一些與移植排斥反應相關的非創傷性檢測指標不斷出現：細胞因子的檢測、淋巴細胞檢測、補體和粘附分子檢測、蛋白質和酶類檢測、主要組織相容性復合體 ( major histocompatibility complex，MHC) 檢測等等。
回顧文獻發現許多基于供體特異 cfDNA 檢測的研究方法。非常值得肯定的一點就是，在實體器官移植患者體內存在供體特異性的 cfDNA。正是基于這種理論，許多器官移植排斥反應檢測的研究熱點聚焦于 cfDNA。
實體器官移植排斥反應生物標志物檢測的新方法
鑒于此，德國的 Martina Adamek 和 Gerhard Opelz 等人發表在 Clin Chem Lab Med 雜志上的一篇文章，向我們介紹了一種關于實體器官移植排斥反應生物標志物檢測的新方法。
研究設計 在 Martina Adamek 等人的研究中，依據供者與受者的插入/缺失（InDel）遺傳多態性差異，采用簡單、快速的方法---實時熒光定量聚合酶鏈反應（qPCR），對相應的靶向片段進行分析，結果發現：
1. 對健康獻血者和實體器官移植術后的病人進行細胞游離 DNA(即 cfDNA) 分析發現，總 cfDNA 濃度存在差異。
2. 與健康獻血者（219-2098 GE/mL 血清）相比，移植術后的的病人（756-50549 GE/mL 血清）總 cfDNA 濃度相對較高。所有
3. 腎臟移植手術后 1-3 天的病人進行 cfDNA 分析發現：供體特異的 cfDNA 同樣存在個體間差異，大部分的病人顯示較低的血清供體 cfDNA 濃度（0.48-47 GE/mL），但是也有部分病人的供體 cfDNA 濃度較高（222-314 GE/mL）。
4. 另外，一個重要的結果，同一個病人進行不同的 InDel 分析，其供體 cfDNA 濃度亦不相同。而且，在移植術后病人血清中供體 cfDNA 占總 cfDNA 的比例也存在差異：高達 1.79%，低至 0.01-0.03%。
很顯然，在研究的病人中供體 cfDNA 濃度存在差異，且所研究的病人并沒有急性排斥反應的臨床表現，因此還不能依據供體 cfDNA 濃度或者供體 cfDNA 濃度占總 cfDNA 濃度的比例進行移植排斥反應的早期診斷。
臨床價值
據文獻報道，供體 cfDNA 在器官移植病人術后至少 2 年才能檢出；在移植物功能穩定時，供體 cfDNA 較低，但在急性排斥反應發生時，濃度不斷增加；在移植病人中較高且較穩定的供體 cfDNA 濃度，可能與互相耐受和同種異體移植有關。
該研究的作者為我們展示了一種簡單、快速的方法-----實時熒光定量聚合酶鏈式反應（qPCR）。InDel 多態性成為 qPCR 研究的靶點。相比之下，應用 InDel 生物標志，采用 qPCR 動態檢測患者血清中供體 cfDNA 濃度，作為實體器官移植排斥反應監測的方法具有重要的臨床價值。
該方法的檢測可靠性毋庸置疑，并且建立移植術后較小排斥反應檢測的標準具有可行性。該方法具有簡單、快速的特點，具有廣闊的應用前景。
