實驗材料 大小鼠大腦
試劑、試劑盒 手術器械 顯微冷凍切片機 包埋劑
儀器、耗材 大小鼠立體圖譜
實驗步驟
1. 安裝刀具，移上安全桿。調整切片機溫度到-20 ℃(（右手邊up 和down 二個按鈕調節, up調高溫度, down,降低溫度）。
2. 從-80 ℃冰箱取出腦組織在切片機或-20 ℃冰箱中放1小時左右，目的為了平衡組織溫度，太冷會在切片時出現腦片破裂的情況。
3. 用包埋劑（膠水代替）把組織固定在載物盤上（Blocker），注意一定要把腦放正。
4. 后退樣品固定器（specimen holder），固定載物盤，并適當調節搖桿， 使的上下左右都正。
5. 打開安全桿，.前進載物盤，到適當位置（不要離的太近，以免不小心損壞刀，也不要離的太遠）。
6.
調整刀距（切片厚度，section thickness and trim
thickness），搖動把手（handwheel），開始切片（sectioning）。開始的時候可以選擇大一點的刀距（trim
thickness, 10-500um），到一定位置時使用調到需要的最后切片厚度(section thickness, 1-20 um)。
7. 到適當時候，貼幾張腦片以確定上下左右是否正，并對照圖譜找出大概位置。注意：貼片時手放在載玻片的兩頭，一端靠在切片機刀尾的位置輕輕往下壓。
8. 對照圖譜找到所要找到的核團并各留具有SON，PVN，海馬（CA1，CA2，CA3）的典型腦片，并作上標記。
**PVN的確定：
確定SON后，根據圖譜算出所剩刀數，切去幾刀后，貼片，用伊文斯藍染色一分鐘左右，倒去染液，放在顯微鏡下觀察，開始出現PVN時呈芽狀，然后芽變大, 并向上向外擴, 成傘狀。
9. 把腦片保存到-20 ℃或-80 ℃冰箱，以待以后使用。
10. 清潔切片機，復原。
注意事項
切片機非常昂貴，請好好愛護，并且所有操作嚴格按照示范來，并在有老師的情況下操作。
其他
在切片過程中，視束有什么變化？并畫出出現SON，PVN 和海馬時視束的形狀。