免疫小鼠：取 6~8 周齡 Balb/C 雌鼠，基礎免疫 2 周，靜脈再加強免疫一次，3~5 天后用于融合。
脾細胞制備：
1．引頸處死小鼠，用酒精消毒表體。
2．無菌條件下取出脾臟，剃除結締組織和脂肪，用 5ml 無血清培養液沖洗一次。
3．把脾臟置于已消毒的 90~100 目不銹鋼網或尼龍紗網中。
4．在脾中部切開一小口，用注射器芯從一端輕輕壓擠，再用無血清培養液沖洗，令細胞通 過紗網，收集入平皿中，或用注射器向脾臟內注入 3 ml 無血清培養液，反復抽吸數次方 法獲取細胞，再制成細胞懸液亦可。
5．把細胞懸液注入 50ml 離心管中，加 10~20ml 培養液，輕輕吹打數次，室溫中置 5 分鐘。
6．離心（800~1000 轉/分）計數，備用。