核提取物的制備實驗（二）

細胞核

KCl高鹽緩沖液

透析膜離心機

1.  按基本方案中歩驟1~7操作。

2.  將細胞核懸液分成5等份。在冷室內不斷攪拌，按如下方法在每份懸液中加入1/3體積髙鹽緩沖液，在第1份中加濃度最低（0.8 mol/l）的高鹽緩沖液，其余各份中依次加入KCl濃度逐漸增髙（直到1.6 mol/l）的高鹽緩沖液。輕輕混合30 min。

3.  25 000 g 離心30 min。將上清進行透析（見基本方案步驟10），直到加濃度最髙的那份核懸液的電導達到與透析液一致（100 mmol/l KCl）。各份提取物25 000 g 離心20 min。

4.  檢測各份提取物的電導并測定蛋白質濃度（見基本方案步驟12）。用預定的方法分析提取物以確定最佳提取條件。