1. 國內梅毒血清學試驗的傳統程序是:先以非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR、TRUST、VDRL等)進行初篩,再以梅毒螺旋體抗原血清試驗(如TPPA、TPHA、FTA-ABS等)進行確認。美國、法國和比利時也采用類似的程序。該程序的優點是排除了大多數感染過梅毒但經過充分治療的病人,從而使臨床更易決定是否需要進行抗梅治療。但該程序也存在明顯的缺陷。一方面非梅毒螺旋體抗原血清試驗易出現前帶現象,使早期梅毒及合并感染HIV時高滴度的血清樣品呈現假陰性反應;另一方面,對于一期梅毒早期、隱性梅毒,尤其是晚期梅毒,非梅毒螺旋體抗原血清試驗缺乏足夠的敏感性。因此,僅以RPR或TRUST進行初篩,會造成相當比例的漏檢,這不符合初篩方法高敏感性的要求。近年來,美國已將梅毒螺旋體抗原血清試驗(TPPA)引入到血站系統的初篩檢測中,臨床上僅以非梅毒螺旋體抗原血清試驗作為篩查的狀況也在逐漸改變。
2.將梅毒螺旋體抗原血清試驗和非梅毒螺旋體抗原血清試驗組合在一起(如RPR+TPHA或TPPA)作為初篩試驗可以最大限度地檢出各期梅毒病例(除一期梅毒的極早期),同時保證了敏感性和特異性,是最為理想的梅毒初篩方案。這是世界衛生組織(WHO)推薦的方案,英國等一些歐洲國家也已采用多年。其缺點是費時費力,實驗室的工作量較大。
3.在德國和荷蘭等國,則僅以梅毒螺旋體抗原血清試驗作為初篩方法,這比僅以非梅毒螺旋體抗原血清試驗進行初篩在敏感性上有了明顯提高。雖然效果略差于上述的組合方案,但工作量也相應減小。
4.梅毒的確認必須采用梅毒螺旋體抗原血清試驗,最常用的是TPPA或TPHA,也可采用ELISA。FTA-ABS仍被認為是梅毒血清學測定的“金標準”,但使用上有很大限制。多數實驗室無法常規開展,因此一般只用于對有爭議標本的檢測。如果僅使用非梅毒螺旋體抗原血清試驗進行初篩,則可以用任意一種梅毒螺旋體抗原血清試驗做確認;如果在初篩時已使用了梅毒螺旋體抗原血清試驗,則可以考慮選用另一方法學的梅毒螺旋體抗原血清試驗進行確認(例如在初篩時使用了TPPA或TPHA,則可用ELISA進行確認,反之亦然)。
5.梅毒螺旋體抗原血清試驗檢測的是IgM和IgG的混合抗體,不能區分梅毒的現癥感染和既往感染,也不能用做療效監測。一般認為,IgM型抗體和反應素在感染梅毒螺旋體后出現,經正規、足量抗梅治療后其滴度會逐漸下降直至消失。因此,以ELISA檢測抗螺旋體IgM抗體,或以非梅毒螺旋體抗原血清試驗檢測反應素的滴度是判斷是否需要治療及進行療效觀察的主要參考指標。目前國內質量過關的梅毒IgM抗體試劑盒并不多見,非梅毒螺旋體抗原血清試驗仍是這方面工作常用而有效的方法。
6.建議臨床上進行梅毒血清學診斷的幾套方案:
(1)有條件的,以梅毒螺旋體抗原血清試驗和非梅毒螺旋體抗原血清試驗的組合進行初篩,再以另一方法學的梅毒螺旋體抗原血清試驗進行確認。
(2)以梅毒螺旋體抗原血清試驗進行初篩,陰性可基本排除梅毒,陽性時再加做非梅毒螺旋體抗原血清試驗。兩個試驗均呈陽性反應,應考慮進行治療;若梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性而非梅毒螺旋體抗原血清試驗陰性,應詢問病人是否有既往的梅毒感染和治療史;若病人否認有既往史,則應進行隨訪觀察或用另一方法學的梅毒螺旋體抗原血清試驗進行重復測定(特別有爭議時可選用FTA-ABS進行測定),并結合臨床情況做出最終的判斷。
(3)病人和實驗室條件不允許的,才應考慮單用非梅毒螺旋體抗原血清試驗進行初篩。陽性時以梅毒螺旋體抗原血清試驗做出確認。
7.輸血及手術前進行血液篩查時,醫院應盡可能選用敏感性高的試劑,以避免因漏檢給醫院在法律上帶來不必要的麻煩。因此,在梅毒項目上,應使用敏感性高且能發現既往感染的梅毒螺旋體抗原血清試驗。
8.產前檢查時也應選擇敏感性高且不能區分既往和現癥感染的梅毒螺旋體抗原血清試驗。感染過梅毒的孕婦即使經過足量治療而癥狀消失,在懷孕的應激狀態下也易出現復發等情況。因此,無論是現在或者過去曾經感染梅毒,都應提醒臨床特別加以注意。
9.ELISA方法是近年來發展起來的梅毒血清學檢測方法,既可用于初篩,也可用于確認,它具有結果判斷客觀、可實現自動化等優點,比較適合于標本量大的實驗室(如月標本量在2000份以上)。但梅毒ELISA試劑的品牌眾多,所用抗原及生產工藝各不相同,造成產品質量上的差異也較大,因此在選用時應充分做好評估工作。
10.TPPA與TPHA的方法學都是顆粒凝集試驗,主要的不同在于所用的載體。TPPA的載體是人工合成的明膠顆粒,粒徑可控,大小均一,批間差小,顆粒上沒有無關抗原,消除了TPHA所用紅細胞載體的各種缺點,因此在敏感性、特異性、穩定性、凝集反應判讀的清晰性等各方面均優于TPHA,是TPHA的升級換代產品。此外,TPHA的品牌眾多,而TPPA由于有ZL保護,僅有日本富士瑞必歐公司獨家生產,因此在抗原和生產工藝上也更為穩定。
金標多采用的是檢測血液反應素(包括RPR和TRUST)的原理,而在一些特異性疾病(如孕婦,急性病毒感染,老年人,自身免疫疾病等)均可出現反應素,這就是梅毒檢測中出現假陽性的一個原因。要完全克服問題:最好是先TPPA初篩,再RPR或者TRUST確定是否新近感染。
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