提高柱效，改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最后一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恒流泵，否則難獲重復結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。
（一種原理，前者為洗脫裝置和柱子之間封閉，適用于配備壓力泵的色譜柱，后者為洗脫裝置和柱子之間隔離開來，是梯度洗脫的簡易裝置。）：兩個容器放于同一水平上，兩容器連通，B與柱相連，當溶液由B流入柱時，A中的溶液就會自動來補充，經攪拌與第一容器的溶液相混合，這樣流入柱中的緩沖液的洗脫能力即成梯度變化。