紅細胞形態學報告等實用性
問：能對做全細胞計數（CBC）的樣品報告紅細胞（RBC）形態學與全血細胞分類對照的實用性進行一下評論嗎？我們目前對任何紅細胞分布密度（RDW）<11.0或>17.0、或有異常RBC/HGB比率的樣品均進行血片掃描。這些指南臨床上有用嗎？同樣，我們對指數與形態學的相關性感到疑惑，平常可見到血紅蛋白減少而平均血紅蛋白濃度（MCHC）正常、或小紅細胞增多而紅細胞平均容量（MCV）正常的情況嗎？
答：即使不要求進行分類，某些情況下的紅細胞形態學評估還是有用的。特別是在有球形紅細胞（溶血）、淚滴狀紅細胞（骨髓纖維化、骨髓癌轉移）或鐮刀形紅細胞（鐮刀形紅細胞貧血）存在的情況下，形態學所提供的信息遠遠高于標準指數。異常指數可對這些形態學異常提供線索，因而在適當的位置上一些參數是有用的。RBC/HGB異常比例主要集中于有貧血和RBC計數升高的患者、如包括地中海貧血在內的血紅蛋白病。一般說來，對增高的RDW（如>17.0）進行涂片檢查是很有用的，它表明有兩種細胞形態群和其它紅細胞異常形態，從而為臨床提供了重要信息。低RDW（<11.0）雖然表明RBC群大小一致，但卻無臨床意義。
指數與形態學之間有相關性。儀器檢測是很準確的，特別是在檢測大小（MCV）和大小的變化（RDW）方面，因為相比單獨的形態學評估儀器檢測能查看更多的紅細胞，并可用三維構形評估紅細胞。但這并不意味著儀器檢測是完美無缺的。儀器不能測定紅細胞的內含物如何—喬氏（Howell-Jolly）小體、嗜堿性點彩和帕彭海姆（Pappengheimer）小體，測小量異常細胞群亦有困難。在這些情況下MCV可以正常，但可有小紅細胞亞群的存在。這種情況下MCV與其它RBC指數之間的相互關聯很重要。如RDW增加反映出了紅細胞大小范圍的增大。總而言之，這些病例中形態學的實用性取決于患者人群，如你的患者中有包括很多不同種族背景的患者在內，這些分析會更有用。
尿量過少
問：尿液離心作鏡檢的量有標準嗎？如送檢的尿液量太少，鏡檢結果需要根據送來的尿液樣品量進行校正嗎？我們目前應用的是BD尿液分析管（8ml），有些實驗室要求的是10ml尿液，如果送檢尿液量太少，結果報告如何說明？
答：尿液鏡檢所需的離心沉淀標準量各個實驗室要求的不盡相同（10ml、12ml、15ml）。尿液分析系統的生產廠商也有不同的沉淀濃度要求（30:1、15:1和12：1）。推薦尿液鏡檢離心的標準量為尿液的10:1濃度。如僅有8ml尿液，可采用下列兩種方法中的一種：
1. 取5ml尿液離心，然后去除4ml，其結果要乘以2；
2. 取8ml尿液離心，將最后量減少至0.8ml，維持10:1濃度。
DIC試驗
問：我們實驗室接到了一些有關DIC試驗的詢問。我們現在進行的DIC試驗是凝血酶原時間（PT）、部分凝血活酶時間（PTT）、纖維蛋白原（FIB）、D二聚體和全血細胞計數（CBC）。在這些試驗的基礎上將纖維蛋白單聚物（fibrin monomer）作為附加試驗有幫助嗎？或者說我們目前進行的試驗合適嗎？
答：國際血栓與止血學會（ISTH）在2001年12月出版的“血栓與止血”中將DIC進行了定義并明確了DIC臨床和實驗室驗斷標準。在這一標準中將明顯DIC與非明顯DIC進行了區別。明顯DIC發生于失代償性止血系統，非明顯DIC被作為有微細止血功能障礙的失代償期。
ISTH DIC專門小組對DIC嚴重性的標準化診斷和測定制訂了一個五步診斷規則系統，可用于計算DIC評分。ISTH DIC專門小組2007年3月在“血栓與止血”雜志上發表的結論表明，此評分系統應用5年時間后顯示檢查5個或更多分值能識別明顯的DIC。診斷明顯DIC的規則見表1。
表1 診斷明顯DIC（2-4）的規則
| 危險評估： | 患者是否有已知與明顯DIC有關的潛在性疾病？如有，可進行；如無，則不適合用此規則。進行全部凝血試驗檢查 |
| 全部凝血試驗結果記錄評分 | 血小板計數（>100=0；<100=1；<50=2）纖維蛋白相關標志物增加（例如D二聚體、可溶性纖維蛋白單體/纖維蛋白降解產物）（未增加：0；中度增加：2；高度增加：3）。凝血酶原時間延長（<3秒=0；>3秒而<6秒=1；>6秒=2）纖維蛋白原水平（>1.0g/L=0；<1.0g/L=1） |
| 計算評分： | 如>5符合明顯的DIC；如<5每日重復記分：提示非明顯的DIC（不肯定）；再重復1~2天 |
該報道強調的是用于診斷明顯DIC的應該是現有可行的實驗室試驗。ISTH的DIC專業小組建議的實驗室診斷明顯DIC的標準包括血小板計數、凝血酶原時間、纖維蛋白原含量和纖維蛋白存在的一種標志物。標志物可選用下述一種：可溶性纖維蛋白單體、纖維蛋白降解產物和/或D二聚體。在DIC的專門小組2003年會上推薦D二聚體為理想的纖維蛋白標志物。
因而以下系列檢測即PT/FIB/D二聚體/CBC在評估明顯DIC上是合適的，不必包括纖維蛋白單體測試。
問：請對便隱血試驗的不同方法學進行一下介紹和評價。
答：一、便隱血試驗的方法學可分為
1、按實驗方法學分為：a、免疫法（以金標層析法為代表）、b、化學法（以匹拉米洞法為代表）、C、免疫a+化學b為雙聯法（也稱序貫法）。另有查卟啉鐵及卟啉衍生物，該實驗優點是可以定量，缺點是需要特殊的檢測設備及成本過高。目前國外已開發出了全自動或半自動OB檢測儀，不足之處在于成本太高。
二、OB免疫及化學檢測方法中的常見問題及答疑
1、為什么說“半定量雙聯法”是檢測便隱血的最佳方法？如何進行結果判斷？
答：可分別參見表1和2
表1
| 免疫法 | 化學法 | |
| 特異性 | 高 | 低 |
| 靈敏度（ug/g stool） | 高（0.1） | 較高（50） |
| 對上消化道出血的漏檢（檢出率） | 會（約60%） | 不會（100%） |
| 鉤狀效應（Hook’s效應） | 有 | 無 |
| 半定量 | 不能 | 能 |
| 檢測成本 | 高 | 低 |
| 大批量人群普查 | 不適合 | 適合 |
| 保存、效期 | 不易、短 | 易、長 |
表2 . 結果判斷
| 免疫法 | 化學法 | 分析 |
| 陽性（+） | 陽性（+） | 確定為陽性結果，化學法可查出其出血程度（半定量） |
| 陽性（+） | 陰性（-） | 確定為陽性結果，但其檢體隱血的含量極微少 |
| 陰性（-） | 陰性（-） | 確定為陰性結果 |
| 陰性（-） | 陽性（+） | 1、此病人為上消化道微量出血（此種情形可能性較低）2、化學法的陽性結果為食物或藥物所引致的假陽性（此種情形的可能性較高）。3、Hook’s效應導致的免疫法為假陰性。 |
2、檢測便隱血的方法是否越靈敏越好？最佳檢測便隱血的靈敏度是多少？
答：不是。用5lCr標記檢查正常人糞便中每天血液丟失量為0.5±0.4ml（最多可達1.5ml），相當于每克糞便的含量為100-900ìgHb，平均為500ìgHb，故試劑的檢測靈敏度在50ìgHb/g stool時能查出所有病理及部分生理狀況下的人群，而再提高靈敏度可能只會增加檢測的非病理狀況下的陽性。
3、兩類方法實測靈敏度的差異。
答：免疫法的檢查終產物是經過標本稀釋（已做了500倍左右的稀釋處理）后的產物。其實測若以靈敏度為0.1ìgHb/g stool計算，其最終測得最低值也為50ìgHb/g stool。故其糞OB檢查的閾值應定為50ìgHb/g stool較合適。
4、何為鉤狀效應（Hook’s效應）？其對實驗結果的影響及解決方法。
答：Hook’s效應為單克隆抗體與所抗的Hb抗原不匹配或消化道出血過多，抗原過剩時造成的假陰性結果。其解決方法為將標本繼續做1:500倍的稀釋后再做實驗。
5、為什么免疫法會漏檢上消化道出血？
答：上、下消化道出血以胃底部為分界。
上消化道出血：
每天出血量與檢測閥值
| 胃 | 結腸 | |
| 卟啉實驗 | 2ml | 2ml |
| 愈創木脂 | 10-20ml | 0.5ml |
| 免疫法 | 100ml | 0.25ml |
6、在三種化學方法中，為什么選擇“匹拉米洞法”作為首選方法？
答：目前常用的三種化學方法及各自特點見下表：
| 聯苯胺 | 愈創木脂（水溶、非水溶） | 匹拉米洞 | |
| 致癌性 | 有 | ? | 無 |
| 靈敏度 | 高 | 低 | 中 |
| 假陽性率 | 高 | 中 | 低 |
| 成本 | 低 | 高 | 中 |
| 商品化產品 | 無 | 有 | 有 |
| 生產質控 | 難 | 難 | 方便 |
7、匹拉米洞半定量值分幾級？
答：分5級。
8、如何避免新鮮蔬菜對化學法的干擾（假陽性）？
答：多煮并煮熟蔬菜，可全面去除其干擾。
9、如何進行便隱血標本的稀釋處理（等滲鹽水、蒸餾水、低滲緩沖液）？
答：化學法用蒸餾水，免疫法用低滲緩沖液；二者禁用等滲鹽水。
10、為什么要多點采集樣本？
答：避免采樣誤差。
11、為什么說“雙聯法”是最適合大批量腸癌篩查的首選方法？
答：實驗成本低，準確性高、靈敏度高，操作、質量管理方便等。
12、免疫法有無假陰、陽性？
答：免疫法也有假陽性，如飲用啤酒等；若檢體的pH值改變：pH≤3時呈假陽性、pH≥10時呈假陰性；大分子蛋白可能包裹Hb并使之不易暴露，直接影響Hb與Hb抗體的結合而導致膠體金法假陰性等。大家可以多做實驗進行探討。
