實驗方法原理 1. 了解植物細胞分裂的三種方式;認識分生組織在植物體上的位置及其類型。
2. 掌握植物細胞有絲分裂和減數分裂各時期的特征;掌握分生組織的結構特點。
實驗材料 洋蔥根尖鴨跖草大蒜苗永久制片油菜莖尖新鮮莖段胡桃刺槐枝條小麥幼莖
試劑、試劑盒 冰醋酸醋酸洋紅龍膽紫醋酸碘化鉀番紅水
儀器、耗材 顯微鏡水杯剪刀培養皿燒杯指形管滴管載玻片蓋玻片吸水紙酒精燈刀片鑷子解剖針紗布毛筆
實驗步驟
一、植物細胞分裂
植物細胞在進行生長發育過程中,不斷地進行細胞分裂,增加細胞的數目。植物細胞分裂的方式有有絲分裂、無絲分裂、減數分裂三種,其中最普遍、最常見的是有絲分裂。
1. 植物有絲分裂的觀察
(1)有絲分裂是真核細胞最普遍的細胞分裂方式。
由于細胞分裂過程出現了染色體和紡錘絲,而取名有絲分裂,又叫間接分裂。
有絲分裂過程復雜,包括核分裂和胞質分裂兩個步驟。人們為了解說上的方便,通常把核分裂劃分成間期、前期、中期、后期和末期。但實際上核分裂是一個連續的過程,各時期中間有一系列過渡狀態,在實驗過程中應仔細觀察、理解。
(2)將洋蔥置于水杯中,水面剛好接觸洋蔥的鱗莖盤的基部,3-4天后洋蔥便可長出白根。根長度達到1-1.5厘米便可剪取使用。
將剪取的根尖置于冰醋酸—酒精固定液中,在室溫下固定2-24小時,可將材料固定。固定的材料如不及時使用,可以經過50%的酒精到70%的酒精中各半小時,再換70%酒精保存備用。
將固定的材料置于酒精一濃鹽酸的解離液中10-20分鐘,使根尖的胞間層離析。如用新鮮材料,可取材后直接置于解離液中,可同時起到固定和解離作用。解離時間的長短,視材料而定,洋蔥或小麥解離時間可稍長,蠶豆解離時間可稍短。但應注意各種材料的解離時間都不能過長,否則不易染色。
解離后再換酒精一冰醋酸固定液中5-10分鐘,可起到細胞壁軟化的作用(即再腐蝕細胞壁)。
然后洗去固定液,將材料放置在指形管或小燒杯中換水洗4-5次,洗凈鹽酸,利于染色。
將材料置于載玻片上,切去延長區和根冠部分,留根尖的分生部位約1
mm,加1滴醋酸洋紅染液,放置10分鐘,待根尖染至暗紅色,加蓋玻片,將吸水紙或紗布放在蓋玻片上面,左手按住載玻片,用右手拇指在吸水紙或紗布上,對準根尖部位施加壓力,將根尖材料壓成一均勻的薄層。壓力要適當,使細胞和染色體能散開即可,過力有可能使染色體破壞。為了增加染色效果,可將載片在酒精燈上微微加熱。
最后可在蓋玻片的一側滴一滴清水,用吸水紙從蓋玻片的對側將水吸進蓋玻片內便可鏡檢觀察。在觀察過程中移動載玻片,注意檢查,可在不同的視野中找到有絲分裂的各個時期。
此實驗也可用1%的龍膽紫染色1分鐘后,用20%醋酸(50%酒精配制)洗幾秒鐘后制片觀察,可見染色體為藍紫色。
2. 植物細胞無絲分裂的觀察
無絲分裂有多種形式,最常見的是橫縊式分裂,細胞核先拉長,然后在中間縊縮最后斷裂成兩個子細胞核。在示范顯微鏡下觀察鴨跖草或大蒜幼苗葉鞘表皮臨時裝片,了解植物細胞無絲分裂現象。
3. 植物細胞減數分裂的觀察減數分裂是植物進行有性生殖時發生的細胞分裂,細胞分裂過程與有絲分裂相似,但細胞連續分裂兩次,染色體只復制一次,因此,一個母細胞分裂成四個子細胞,子細胞的染色體數目只有母細胞染色體數目的一半。
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