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  • 發布時間:2022-05-25 09:39 原文鏈接: 椰子死亡類病毒的檢驗方法

    電泳檢測

    應用雙向電泳法可有效地檢測此種類病毒。第一向電泳是利用分子量的不同將類病毒與寄主核酸分開,第二向電泳是在變性條件下把類病毒的環狀和線狀分子分開(環狀分子比線狀分子跑得慢),從而確定有無類病毒。銀染色技術的應用,將電泳檢測靈敏度提高到放射性同位素標記方法的水平。

    分子雜交

    一類是RNA探針,即利用純化的類病毒作RNA未端標記,進行RNA-PNA雜交,這種方法在很短時間內就能制備出探針,但制備量少,一般不用此法。另一類是cDNA探針,這是將椰子死亡類病毒RNA先逆轉錄成與之互補的DNA(cDNA),然后再標記成為cDNA探針,只需少量RNA就能制備出大量探針。現在一般用此方法,探針的標記可以用同位素,也可以用非同位素,只要在樣品中含有與探針互補的核酸則呈陽性檢測結果。

    PCR是目前用于類病毒檢測更為理想的方法。

    生物測定

    人工接種的椰子幼苗,在心葉以下至少有3處嫩葉出斑點,同時植株生長變慢,葉子變小,新生葉減少,到預定的結果期不結果。檳榔(Arecacatechu)、高行李葉椰子(Corypha elata)、馬尾拉棕櫚(Adonidia merrilli)、油棕、散尾葵(Chrysalidocarpus lutescens)和王棕櫚(Oreo-doxa regia)等,人工接種后,其嫩葉褪綠或出現桔紅色斑點,由于潛育期太長(2~4年)很少有人用此方法。

    有關檢疫規定

    椰子死亡類病毒是中國公布的《中華人民共和國進境植物檢疫危險性病、蟲、雜草名錄》中規定的二類危險性病毒,應嚴格限制從疫區引進椰子種苗。必須引進的種苗,需由輸出國出具檢疫證書,引進后在隔離檢疫圃試種2年以上。


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