試驗設計:設計試驗在生物毒性試驗中是一項重要內容,在進行每一項毒性試驗時,都應該事先查閱相關文獻,然后根據試驗目和要求制定制定周密的試驗方案。對水生生物進行的毒性試驗設計大致包括:
(1)選擇受試生物;
(2)設置毒物濃度;
(3)試驗持續時間;
(4)受試生物的數量及分布;
(5)確定觀察指標及測定方法。
試驗溶液的配制:配制方法主要有兩種,一是根據試驗毒物濃度和試驗溶液體積按需將要量直接將測試化合物加入水中,二是將被測試化合物先配制成濃度較高的配置液,然后按照設置的試驗毒物濃度和溶液體積稀釋而成。
預備試驗:預備試驗的目的是為正式進行毒性試驗確定濃度范圍。預備試驗通常選擇3-5個間隔較大的濃度范圍和少量的受試生物。觀察24-96h,求得100%死亡濃度和0%死亡濃度。然后在兩者之間選擇5-7個試驗濃度進行正式試驗。
試驗濃度的選擇:根據預備試驗的結果和確定的試驗濃度組數,在急性毒性試驗中,一般按照等對數間距來確定試驗溶液中待測試有物質濃度。
試驗負荷:是指單位體積試驗溶液中投放實驗生物的重量。一般按照下列原則設置試驗負荷:
(1)受試生物對毒物的吸收、吸附不得引起試驗溶液中溶解氧和毒物濃度的明顯下降;
(2)受試生物的代謝產物的積累不超過允許水平;(3)受試生物有一定的活動空間。
試驗期間的施肥和投餌:急性毒性試驗試驗期間不投餌,慢性毒性試驗一般至少每天定時投喂一次。