4、襯管形狀:
(1)毛細管柱分流進樣的襯管一般不用直通式,襯管內有縮徑結構、燒結玻璃粉、玻璃棉或石英玻璃棉等。這主要是為了增大與樣品接觸的表面積,加快氣化速度,減小分流歧視。同時能防止不揮發性組分和機械雜質進入色譜柱,保護色譜柱不被污染。
(2)毛細管柱不分流進樣的襯管最好采用直通式。這主要是為了使樣品在氣化室中盡可能少稀釋,減小初始譜帶寬度。襯管容積小些有利,一般為0.25~1mL。
(3)冷柱上進樣不用襯管,采用保留間隙管。
(4)采用自動進樣時,因進樣速度快,樣品揮發快,一般采用容積大的直通式襯管。
5、襯管容積:
襯管容積是影響定性和定量分析結果的重要參數之一,基本要求是襯管容積至少等于樣品和溶劑氣化后的體積。如果襯管容積太小,進樣時柱前壓會突然升高,引起樣品倒灌。如果襯管容積太大,會使樣品初始譜帶展寬,產生柱外效應。
常用樣品溶劑氣化膨脹后的體積:
條件:進樣體積1μL,氣化溫度250℃,柱前壓0.14 MPa
(1)異辛烷:110μL
(2)正己烷:140μL
(3)甲苯:170μL
(4)乙酸乙脂:185μL
(5)丙酮:245μL
(6)二氯甲烷:285μL
(7)二硫化碳:300μL
(8)乙氰:350μL
(9)甲醇:450μL
(10)水:1010μL
6、襯管填充物:
玻璃襯管中填充石英玻璃棉的目的是使樣品混合物均勻,充分氣化,防止不揮發性組分和機械雜質進入色譜柱。
(1)石英玻璃棉填充量:
1)分流進樣襯管填充量較大,不分流進樣和大口徑毛細管柱直接進樣約為分流進樣的1/5,直接進樣一般不用填充。
2)高吸附性樣品如農藥,少填會得到更好的分析效果。
3)樣品中含有非揮發性化合物或某些特殊樣品,減少或改變填充量可能分析效果更佳。
4)對于高氣化熱的溶劑如水,適當增加填充量會得到更好的分析效果。
5)石英玻璃棉填充應均勻,不宜太緊,也不宜太松。
(2)石英玻璃棉填充位置:
一般位于注射針尖下方1~2mm左右,太遠太近都會使分析結果重復性差。
(3)襯管和石英玻璃棉的硅烷化:
雖然玻璃襯管的金屬活性小,但其內表面仍有活性點,石英玻璃棉也存在活性點,對于某些樣品特別是農藥,為了減少吸附性和分解,需進行硅烷化處理。進樣器在高溫操作時,硅烷化處理的有效作用只有幾天,應及時更換硅烷化襯管和石英玻璃棉,否則要重新硅烷化。
常用硅烷化方法是二甲基氯硅烷化。
1)襯管或石英玻璃棉用丙酮等清洗,涼干后在5%正己烷溶液中浸泡12h左右。
2)取出浸泡后的襯管或石英玻璃棉,立即用甲醇清洗2~3次,然后在甲醇中浸泡1h左右。
3)從甲醇中取出涼干后,與二甲基氯硅烷一起在干燥條件下保存。
7、襯管密封:
玻璃襯管常用密封材料是耐溫硅橡膠和石墨。襯管上端的“O”形硅膠密封圈用一段時間后,會形成載氣旁路(分流、柱流量),使峰忽大忽小,造成無法定量。因此,除保證襯管初裝時的密封性外,還要及時檢漏和更換。當進樣口溫度超過400℃時,zui好采用石墨密封圈。使用石墨密封圈時,密封圈尺寸規格要和襯管相匹配,否則極易漏氣。
氟橡膠密封性比石墨好,但長期在高溫下工作,容易漏氣,壽命較短。
8、襯管清洗:
襯管使用一段時間后,襯管中的石墨墊粉末會附著溶劑,襯管中的石英玻璃棉會沾有隔墊碎片,需要進行清洗。清洗前一定先除去原有石英玻璃棉。清洗后應避免用手觸摸,以防油脂污染。清洗方法主要有:
(1)用蘸有溶劑(視樣品情況選用溶劑)的紗布擦洗襯管內壁,若襯管內壁污垢較多,將襯管有污垢部分浸入溶劑中數小時后,再反復擦洗直至干凈。清洗后的襯管涼干后,填充石英玻璃棉,在250℃恒溫箱中烘干。
(2)熱酸氧化除污。
(3)在火焰中加熱到500℃,除去有機殘留物。
9、襯管引起的故障:
(1)樣品歧視。
(2)樣品可能分解。
(3)樣品倒灌:
1)大體積進樣時氣化溫度太高。
2)進樣量太大。
3)襯管容積小。
(4)定量重復性差。
(5)峰形畸變。
(6)引起鬼峰。
10、使用注意事項:
(1)對于分流進樣和大體積進樣,進樣量一般大于1μL或更大,襯管容積應大于800μL或更大。對于快速分析(100μm小直徑柱)、頂空進樣和熱解析進樣等,襯管容積應適當減小。
(2)更換襯管時,安裝位置要重現。
(3)當峰出現拖尾、定量重復性變差或檢測器靈敏度明顯減小時,應及時更換去活襯管或對襯管進行再去活處理。
(4)對于“臟”樣品,建議襯管每天更換一次。干凈樣品視情況而定。襯管一般可一個月更換一次。
(5)襯管內填石英玻璃棉不適合分析酚類、有機酸類、農藥類、胺類、性極性化合物和熱不穩定性化合物等。
(6)為防止注射針頭進樣時穿過石英玻璃棉,可在針頭上裝一個或幾個隔墊。
(7)為防止在襯管中石英玻璃棉位置改變,一定要在柱前壓降至零時更換隔墊和毛細管柱。
(8)襯管破碎后,應從柱箱內拆去毛細管柱、柱接頭與氣化室連接插件后,才能清除氣化室中的襯管玻璃碎片。清除時玻璃碎片一定要清除干凈,否則再裝襯管時,密封面容易造成損傷而漏氣。
(9)新樣品分析前應考慮:
1)襯管規格和形狀。
2)是否填充石英玻璃棉。
3)是否要硅烷化。
4)已安裝好襯管要復查密封性。
5)襯管是否破碎。
6)石英玻璃棉位置是否已改變。
7)注射針插入深度。
8)襯管和石英玻璃棉是否更換或重新硅烷化等。
(10)襯管引起重復性差的主要原因:
1)石英玻璃棉填充不當。
2)硅烷化作用失效。
3)進樣量大可能出現樣品氣化后倒灌。
4)填充的固體吸附劑或固定相不能正常發揮作用。
六、進樣器死體積:
對于填充柱,進樣器死體積可以忽略。
對于毛細管柱,進樣器死體積對峰展寬的影響不能忽略,應盡量減小進樣量,適當提高氣化溫度,增大載氣流量和分流比(若靈敏度允許)。若仍不能滿足要求,只能考慮各種聚焦(濃縮)技術,如程序升溫、溶劑聚焦即毛細管柱不分流進樣的柱溶劑效應和冷阱聚焦即用致冷劑實現低溫(比樣品沸點低150℃左右)濃縮。
七、液體微量注射器:
氣相色譜儀分析中,液體微量注射器進樣對定性和定量重現性影響因素是多方面的,如進樣系統的設計原理、結構和材質、樣品中的雜質濃度和組分的理化性質、進樣條件(氣化溫度、載氣流量、隔墊吹掃氣流量、襯管和隔墊老化等)、注射器規格、結構和質量、正確使用和保養、進樣技巧(注射器取樣方法、注射針的插入深度和拔出時間)等。
1、進樣前考慮:
(1)進樣速度:
進樣速度依賴于樣品類型、色譜柱類型、加熱方式、氣化室結構、載氣流量、襯管類型和分析要求等。若組分的揮發性大或峰寬小,注射速度應盡量快。如果注射時間超過峰寬,峰將加寬、拖尾和分離變差。若組分沸點高或保留時間長,進樣速度顯得不太重要。
(2)注射針插入深度:
進樣器結構不同,注射針插入深度不同。
冷柱上進樣時針尖必須插到柱頭,一般氣化室針尖必須插到有效加熱區或襯管的內填充物上方1~2mm處,才有利于樣品的瞬時氣化和以“塞子”進入色譜柱。每次插入深度應相同。
(3)隔墊松緊:
隔墊過緊有利于密封但進樣困難,不易重復,隔墊壽命短。實際操作時,應根據柱前壓大小適當調節松緊,以保證撥針不漏氣為準。實驗表明,某些情況下注入樣品后在進樣口停留幾秒,有利于隔墊較松時進樣的重復性。
2、進樣方法:
(1)一般進樣方法:
1)吸取樣品前,先用溶劑清洗3~5次,進樣前再用樣品清洗3~5次。
2)對于10μL以上注射器,吸取樣品時要注意有無氣泡。
3)注入GC前,把蘸在針頭的多余樣品用濾紙擦去。
4)注射時不要邊扎邊推注射桿,當針全部插入氣化室后,進樣并敏捷拔出注射針。
(2)空氣夾心取樣進樣法:
死體積10μL以上的微量注射器吸入樣品后,通常在針頭殘留零點幾微升的樣品,在此狀態下注入高溫氣化室時,針頭部分的樣品會先氣化進入色譜柱,再是其余的樣品,這近乎打兩次針(兩次進樣)。為了克服這個缺點,可采用空氣夾心取樣進樣,即在取樣前,注射器先吸取一定量的空氣,然后吸取一定量的液體樣品,再吸取一段空氣后進樣。采用這種方法吸取的樣品夾在兩個空氣柱之間。
(3)空氣溶劑夾心取樣進樣法(溶劑閃蒸進樣法):
具有高沸點組分的樣品進樣注入后,注射針內會有殘留現象,這樣進入色譜柱的樣品組成與原樣品組成不同。一般來說,低沸點組分進入色譜柱的量相對多,高沸點組分定量值變小。為防止進樣歧視,可采用空氣溶劑夾心取樣進樣,即在取樣前,注射器先吸取1μL溶劑和0.5μL空氣,然后吸取一定量的液體樣品,再吸取一段空氣后進樣。采用這種方法吸取的樣品,可確保全部注入GC,注射針內不會有殘留現象。
3、使用注意事項:
(1)注射樣品量在注射器量程的2/3左右為佳。
(2)注射器量程的校正方法有汞稱重法和比較法等。
(3)注射器量程校正比較困難,為了減小進樣量誤差的影響,應采用內標法定量,盡可能采用同一支注射器進樣。
(4)注射器有一定壽命(主要指抽取次數)。10μL注射器以能否在浸潤針壁排出氣泡為準。
(5)不宜快速推拉針頭,太快不但不宜排出氣泡,還會損壞。
(6)0.5~1μL微量注射器的針芯拔出針頭時,不要再用力推回,需把針頭與刻度針管連接螺母扭開,用手輕輕把針芯穿過密封墊后再扭回螺母。
(7)注射器被污染或用于注射其它樣品后,清洗后可以再使用。但應注意:
1)不能通過清洗后用同一支注射器注射不濃度的樣品。
2)注射濃度過高的樣品后,不能注射低濃度(痕量)樣品。
3)像ECD分析所用注射器只能專用。
(8)一天注射分析后或注射沸點過高樣品的注射器,必須經清洗后方可存放,否則會粘住。
(9)針尖處的殘留樣品是影響分析重復性的主要因素之一,進樣前要用濾紙擦去。
(10)特別是痕量分析時,應避免用手觸摸針頭,以防引起鬼峰。
(11)清洗注射器時,若不能從針頭吸入溶劑,可拔出柱塞從后部注入溶劑浸泡清洗。
(12)根據樣品特點,備好清洗注射器的溶劑和裝廢液的容器。
八、微量注射器進樣與進樣閥進樣的比較:
1、微量注射器進樣:
(1)氣體進樣:
氣體定量分析一般采用外標法,采用微量注射器進樣時注射體積要準確,否則定量準確度很難保證。因此盡量不用。
(2)液體進樣:
采用微量注射器把液體樣品注入加熱的氣化室中,一般不存在蒸發困難的問題。但對于高沸點組分(>300℃)特別是是固體樣品,注射樣品后,針頭可能會殘留高沸點組分。采用溶劑清洗可消除此影響。
2、進樣閥進樣:
(1)氣體進樣:
死體積小的氣體進樣閥進樣的定量分析結果比微量注射器好的多。但對于沸點較高的組分不能較快地從閥中蒸發,會使峰展寬而影響定量,采用恒溫加熱進樣閥進樣能很好的解決這個問題。
(2)液體進樣:
液體進樣閥進樣效果不錯,但不如微量注射器進樣方便,只有某些特殊樣品才考慮采用液體進樣閥進樣。
九、含水樣品的分析:
常量和微量水可以用氣相色譜分析(TCD),FID是*能進水樣的檢測器。由于水不是理想的溶劑,在遇到含水樣品的分析時要謹慎處理。水某些物理特性對分析有不利影響:
1、水的蒸發膨脹體積zui大,襯管容積小會引起進樣時樣品倒灌。
2、許多固定相對水的潤濕性和溶解性較差。當水進入色譜柱時,在柱壁上不能形成光滑的溶劑膜而形成水滴,導致不能均勻地流過色譜柱,使柱性能變差。當柱溫較低時,部分水以液態流過色譜柱,使在水中溶解性較好的組分峰展寬,甚至峰分裂。
3、水能使許多固定相降解,影響柱性能,使分辨率變差,基線漂移,噪聲增大。
4、采用冷柱上進樣時,不揮發性化合物如水溶性鹽類被液態水帶入色譜柱,會污染色譜柱和系統。
5、大量水會使FID滅火,微量水會使ECD靈敏度降低和線性范圍變窄等。
6、當必須分析含水樣品時,可選擇色譜柱和分析條件,盡量減小水峰對其它峰的干擾,如選用鍵合相柱、柱溫大于100℃和在水樣中適當加入有機溶劑等。