氫化物原子吸收法測定中藥制劑普樂安片中砷的含量

砷是一種有害的重金屬元素，經常攝入微量的砷化合物，會嚴重危害人們的身體健康，因此砷是中藥制劑衛生質量控制中的一種重要元素。要測定中藥制劑中的重金屬元素，首先要對樣品進行消化處理，即破壞、消解有機基體，使待測元素完全轉變為無機離子狀態，從而有效地進行下一步的測定工作。傳統的樣品消化方法有干法灰化或濕法消化，干法灰化操作簡便，但耗時長；濕法消化污染環境嚴重，耗酸量大，且空白值高。微波消化是近幾年發展起來的一種新的消化技術，它結合高壓消解和微波快速加熱兩方面的性能，與傳統的溶樣方法相比，具有樣品消解快、試劑耗用量少、空白值低、避免揮發損失和回收完全等突出優點，還能消解許多常法難以消解的樣品，適合各類分析試樣的前處理，尤其適合痕量分析和超純分析。微波消化已廣泛應用于消化食品、合金、地質樣品和化妝品等，但應用于中藥制劑中微量元素的分析，則少見報道。 
  砷的檢測方法，已有銀量法、砷斑法、比色法等[1-2]。近年來，氫化物原子吸收法逐步被采用，它具有靈敏度高，選擇性好，操作方便快速，干擾少等優點，適合于微量砷和痕量砷的測定。 
  本文建立了微波消化-氫化物原子吸收法測定中藥制劑普樂安片中砷的含量，方法簡便快捷，靈敏度高，是一種行之有效的方法。 

1儀器、試劑與樣品 
1.1 儀器 
原子吸收分光光度計；氫化物發生器；金屬套玻璃高效霧化器；微波消解系統。
1.2 試劑 
硝酸為工藝超純；鹽酸、過氧化氫為優級純；硼氫化鈉、氫氧化鈉、碘化鉀、抗壞血酸均為分析純；砷標準儲備液由上海計量測試技術研究所提供。 

1.3 樣品 
  實驗樣品普樂安片由本公司提供。 

2 分析步驟 
2. 1 樣品溶液的制備 
取樣品適量，研細，精密稱取0.3～0.5 g左右于60ml溶樣杯中，加入6.0～10.0 ml硝酸，放在電熱板上加熱，慢慢升溫至1500C。待棕黃色煙霧冒盡后，取下稍冷，再加入1.0ml30%過氧化氫，繼續放在電熱板上1000C加熱20分鐘，取下冷至室溫后，蓋好密封碗，并將溶樣杯裝入消解罐內，放入微波消解爐中，按消解爐操作步驟調壓力由1檔慢慢升至4檔（2.0MPa），消解15分鐘后取出（如消解不完全，則可適當延長消解時間）。冷至室溫后，打開溶樣杯蓋，放在電熱板上1500C加熱蒸發至溶液留0.5ml左右，再用10ml去離子水分兩次沖洗溶樣杯內壁，每次都放在電熱板上1500C加熱蒸發至溶液留0.5ml左右，冷后用去離子水將樣品轉移至25ml量瓶中，加入2.5 ml 15%碘化鉀-2%抗壞血酸混合溶液，再加入2.5 ml鹽酸，用水定容至刻度，搖勻，在1000C水浴中加熱10分鐘，同時做試劑空白。 

2. 2標準溶液的制備 
吸取濃度為1.000g/L的砷標準貯備液適量，用0.5%硝酸稀釋制成濃度為100.0μg/L的砷標準溶液，分別吸取此溶液0.0、0.25、0.50、1.0、2.0ml于25ml量瓶中，加入15%碘化鉀-2%抗壞血酸混合溶液2.5ml，再加入2.5 ml鹽酸，用水稀釋至刻度，1000C水浴中加熱10分鐘，得濃度為0.0、1.0、2.0、4.0、8.0μg/L的標準砷系列溶液。 

2. 3測定 
原子吸收分光光度計工作參數：測定波長193.7nm，燈電流9mA，狹縫（通帶）1.0nm，背景校正關。氫化物條件：氫化物模式為火焰加熱，火焰為空氣-乙炔，燃氣流量1.0L/min，燃燒器高度15.4mm，穩定延時80秒，回到基線延時80秒，氬氣流量200ml/min。用10%鹽酸作載液，以1.0%硼氫化鈉（用0.2%氫氧化鈉溶液穩定）作氫化物還原劑，在氫化物發生器上分別測定砷標準溶液和樣品溶液吸光度，用線性zui小二乘法擬合繪制標準曲線 ，同時測得樣品中砷的含量。 

3 結果與討論 
3.1微波消化條件的選擇 
對于中藥制劑，少則幾味藥材組成，多則幾十味藥材組成，成分復雜不易分解完全，這給樣品的消化處理帶來了較大的困難，加之不同的中藥制劑有不同的工藝制法，可分為膏劑、片劑 、丸劑 、水劑、粉末劑等，對于水劑或膏劑，一般較容易消化，而對于片劑及丸劑等，則需采用較長的時間及較高壓力消化。 
消化溶劑的選用及用量對消化的效果影響較大，在消化過程中應根據樣品的基體組分和被測元素的性質，分解效果，反應后得到的是不是可溶性鹽，所用酸引入空白值的大小，反應的速率等情況來全面考慮選用什么酸，是單一酸還是混合酸。為增加氧化劑對樣品有機質的氧化能力，就必須選擇適合的混酸組、合理的混酸比，因為每種酸都只能有效地分解某一基體中個別組分的能力，混合酸就能達到互補的作用，在溶樣過程中可與另一種酸形成絡合物，有效地溶解樣品。微波樣品制備常用硝酸、鹽酸、硫酸、磷酸、高氯酸、氫氟酸、過氧化氫等作為溶劑，該實驗選用空白值低的工藝超純硝酸作為消解酸，并加入無污染的過氧化氫作為消化樣品的溶劑。經過大量的試驗工作表明，通過控制適當的壓力（1.5-3.0MPa）和時間（5-20分鐘），采用硝酸-過氧化氫氧化體系能將中藥制劑普樂安片中復雜的有機成分消化完全，對于0.3~0.5g試樣，消化體系以6.0~10.0ml硝酸、1.0ml30%過氧化氫為宜。 

3.2預還原劑的選擇 
氫化物發生法測得的砷為三價砷，所以必須預先將五價砷還原為三價砷。參考有關文獻資料[3]，本實驗選擇15%碘化鉀-2%抗壞血酸混合溶液作為預還原劑，實驗結果表明以15%碘化鉀-2%抗壞血酸混合溶液作為預還原劑，加入10.0%可獲得滿意的效果。 

3.3 硼氫化鈉濃度及酸的影響 
反應體系中硼氫化鈉濃度及酸度是影響氫化物充分發生的重要因素。硼氫化鈉濃度對砷測定有較大的影響，若硼氫化鈉濃度過高，由于反應產生大量的氫氣對砷原子的稀釋作用而使靈敏度降低；若硼氫化鈉濃度過低，由于氫化物反應不完全而使靈敏度降低，結果表明硼氫化鈉濃度為1.0%時砷的靈敏度較好。氫化物反應宜在酸性介質中進行，一般常用鹽酸或硫酸來調節反應體系酸度，該實驗選用鹽酸，試驗表明，鹽酸濃度為10%時，發生條件zui佳，砷的靈敏度較好。 

3.4 共存陽離子的影響 
由于用氬氣載出砷化氫，留下干擾物質在溶液中，所以共存陽離子的影響較小。對于2μg /L砷，10mg/L的銅、鐵、鎳、鉛、鎘及鈣離子對測定無影響[4]。 

3.5 共存酸的影響 
如樣品消化后不趕酸即進行測定，則殘留的硝酸能使碘析出，污染整個測定系統，使實驗無法進行。因此，微波消化后，一定要將消化液中殘留的硝酸趕出，否則會導致結果不準確。在測定液中硝酸濃度低于0.05mol/L時，對測定影響較小，若高于該濃度，測定結果發生較大的偏離[4]。 

3.6 標準工作曲線 
在濃度0-8.00μg/L范圍內，以吸光度對砷含量繪制標準工作曲線，采用zui小二乘法求得回歸方程為：Y=0.01346X+0.0028，γ=0.9983，其線性關系良好。 

3.7 精密度試驗 
取同一批樣品（普樂安片,030931批），按供試品溶液的制備方法平行制備6份，在氫化物發生器分別測定砷的含量，結果見表一。 

表一         精密度試驗 
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序號       砷含量       平均含量       RSD 
        （mg/Kg）     （mg/Kg）       （％） 
──────────────────── 
1         0.084 
2         0.076 
3         0.082         0.084         5.9 
4         0.086 
5         0.088 
6         0.090 
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平均含量為0.084 mg/Kg，標準偏差為0.0050，變異系數為5.9%。 

3.8 回收率試驗 
精密稱取已知含量的樣品（普樂安片,030931批）0.4g，分別加入已知濃度的對照品溶液，同供試品溶液制備方法處理樣品并測定砷的含量，結果見表二。 

表二         加樣回收試驗結果 
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樣品中已知量 加入量   測得量   回收率 平均回收率 RSD 
（μg）     （μg）