原理
氨基移換酶也稱轉氨酶。它能催化α-氨基酸的氨基與α-酮基的α-酮基互換，這種作用稱為氨基移換作用。它在生物體內蛋白質的合成與分解等中間代謝中，在糖、脂肪、蛋白質三類物質代謝的相互聯系、相互轉化上，都起著很重要的作用。轉氨酶的種類甚多，任何一種氨基酸進行轉氨作用時，都由其專一的轉氨酶催化。它們的最適PH接近7.4。在各種轉氨酶中，以谷氨酸-草酸乙酸轉氨酶（簡稱谷草轉氨酶、GOT）及谷氨酸-丙酮酸轉氨酶（簡稱谷丙轉氨酶、GPT）活力最強。
上述兩種酶均廣泛存在于生物機體中。在正常人血清中也有少量存在。機體發生肝炎、心肌梗塞等病變時，血清中轉氨酶活力常顯著增加，在臨床上轉氨酶活性的測定有重要意義。測定轉氨酶活性的方法很多，如分光光度法、紙上層析法及光電比色法等。
本實驗利用紙上層析法，檢查由谷氨酸和丙酮酸在谷丙轉氨酶的作用下所生成的丙氨酸，證明組織內氨基移換作用。為了防止丙酮酸被組織中其它酶所氧化或還原，可加碘乙酸或溴乙酸以抑制酵解作用或氧化作用。
氨基酸的紙上層析屬于分配層析。以濾紙及其結合水作為固定相，把欲分離的混合氨基酸樣品加于濾紙上，使流動相（展開劑）經此移動，樣品中各組分就在兩相溶劑問發生分配現象，在固定相中分配比例較大的氨基酸，隨流動相移動的速度就慢；在流動相中分配比例較大的氨基酸，隨流動相移動的速度就快。由于各種氨基酸的分配系數不同，就逐漸集中于濾紙上不同的部位，而彼此分離。層析完畢后，可用茚三酮乙醇液噴灑濾紙，使氨基酸顯色形成斑點。組分的比移值（Rf）表示如下：
各種氨基酸都有其特征的Rf值，因此可根據Rf值來鑒定被分離的氨基酸。
操作方法
一、酶液的制備
將兔擊暈，迅速解剖，取出肝臟，在低溫條件下剪碎。用表面皿稱取1.5克肝臟，放入勻漿器中，再加入 3毫升磷酸緩沖液。研成勻漿后，倒入離心管中，在2500轉／分的條件下，離心5分鐘，取上清液，即為制備的酶液。
二、體外氨基移換反應
取2支試管，編號。向1號試營中加入15%三氯醋酸溶液10滴和酶液10滴，混勻，靜置15分鐘，做對照管。向2號試管中加入酶液10滴，然后向1、2號試管各備加入10%谷氨酸溶液10滴、1%丙酮酸溶液10滴、0.1%碳酸氫鉀溶液10滴和0.05%碘乙酸溶液5滴，混勻，放入37℃一40℃恒溫水浴中保溫1.5—2小時。在保溫過程中，將試管搖蕩幾次。保溫完畢后取出試管，立即向第2號試管中加入15%三氯醋酸溶液10滴以沉淀蛋白質終止酶反應。將2支試管的內容物分別離心，2500轉／分，5分鐘。將上清液轉移到試管中，用塞塞緊，放置于低溫處備用。
二、紙上層析法檢查
取4根毛細管，再取10cm×15cm層析濾紙1張。分別將對照上清液（1號管）、樣品上清液（2號管），標準谷氨酸溶液和標準丙氨酸溶液點在層析濾紙的基線上。點樣時，將毛細管口輕輕觸到濾紙上，使每種溶液分別形成直徑為2—3毫米的圓斑，兩點間隔約1.5cm。為了有足夠量樣品點在濾紙上，每種溶液應重復點3—4次。待自然風干（或用吹風機吹干），再點下一。點樣量應力求均勻相等。
在潔凈干燥的小培養皿中，加入約20毫升酚溶劑（展開劑）。將小培養皿放在層析缸底部，加蓋密閉，保持10分鐘，使缸中展開劑蒸氣達到飽和。將濾紙點樣端朝下懸掛于層析缸蓋中心的掛鉤上，放入層析缸，使點樣端浸入展開劑中約0.5cm，不要使點樣點直接與溶劑接觸，加蓋密閉，進行層析。待展開劑上升至濾紙上端2cm處時（約需1小時），取出濾紙，用鉛筆劃上溶劑前沿，室溫干燥或吹干。用玻璃噴霧器向濾紙均勻噴灑0.1%茚三酮無水乙醇溶液，置60℃一80℃烤箱中烘烤5分鐘，即出現被染成紫紅色的氨基酸斑點。分析比較層析圖借，確定各點的氨基酸組成，并解釋實驗結果。
試劑和器材
一、試劑及材料
（1）實驗動物—家兔 （2）1/15M磷酸緩沖液（PH=7.4）
（3）1%谷氨酸溶液（用KOH中和至中性）
（4）1%丙酮酸溶液（用KOH中和至中性）
（5）0.1%碳酸氫鉀溶液 （6）0.05%碘乙酸溶液
（7）15%三氯醋酸溶液 （8）標準丙氨酸溶液（0.1%）
(9)標淮谷氨酸溶液(0.1%) (10)0.1%水合茚三酮乙醇溶液
(11)酚試劑:在大燒杯中,加蒸餾水40毫升，再加入新蒸餾的無色的苯酚150克。在水浴中加熱攪拌，混合至苯酚完全溶解。將該溶液倒入盛有120毫升蒸餾水的500毫升分液漏斗內，輕輕振蕩混合，使其成為乳狀液。靜止7-10小時，乳狀液變成兩層透明的溶液，下層為被水飽和的酚溶液（即酚溶液），放出下層，貯存在棕色試劑瓶中備用。
二、器材
（1）層析缸 （2）培養皿
（3）解剖刀、剪及鑷子 （4）表面化皿
（5）勻漿器 （6）離心機
（7）毛細管 （8）恒溫水浴
（9）吹風機 （10）噴霧器
（11）層析濾紙 （12）針、線