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  • 發布時間:2019-04-09 20:37 原文鏈接: 水楊酸鈉生物半衰期(t1/2)的測定實驗

    實驗方法原理

    生物半衰期(t1/2)是描述藥物在體內消除的重要參數,定義為藥物在生物體內消除一半所需要的時間,單位通常為小時(h)。大多數藥物遵循一級消除動力學規律(定比消除),其半衰期t1/2為恒定值。多次給藥時,通常經過3~5個半衰期達到穩態血藥濃度,因此測定半衰期t1/2具有重要的臨床意義。實際中,可以通過測定藥物血漿濃度,同時結合給藥劑量和給藥時間,計算半衰期t1/2值。本實驗介紹了如何測定水楊酸鈉的血漿藥物濃度并計算其生物半衰期t1/2值。

    水楊酸鈉濃度測定原理:水楊酸鈉可在酸性條件下生成水楊酸,水楊酸與三氯化鐵反應生成一種紫色絡合物(圖1)。因此通過測定520nm處吸光度值,可計算得到水楊酸鈉的濃度。

    儀器、耗材

    烏拉坦溶液水楊酸鈉溶液水楊酸鈉標準液三氯醋酸10%三氯化鐵0.5%肝素溶液蒸餾水;721分光光度計比色杯離心機渦旋混合器天平動脈插管試管注射器刻度吸量管洗耳球記號筆

    實驗步驟

    1. 麻醉、頸動脈插管 取家兔一只,稱重、記錄性別,耳緣靜脈注射20%烏拉坦5ml/kg麻醉。肝素抗凝后,頸動脈插管,取動脈血備用。

    2. 留取血樣 給藥前留取空白動脈血;然后由家兔耳緣靜脈注射10%水楊酸鈉溶液,2ml/kg。記錄給藥完畢時間,分別留取注射后0,5,10,20,40min的動脈血樣。

    3. 水楊酸鈉血漿濃度的測定

    (1) 標準曲線制備:將0.05%水楊酸鈉標準液倍比稀釋為0.05%,0.025%,0.0125%,0.005%濃度的標準液。

    (2) 測定標準液及不同時間點血樣的吸光度值(表23-2)。

    (3) 計算水楊酸鈉濃度:根據標準曲線得到的線性方程,可求得給藥后不同時間點(0,5,10,20,40min)時,血漿中水楊酸鈉的濃度C0,C5,C10,C20,C40。

    4. 計算水楊酸鈉的生物半衰期t1/2值。利用C0,C5,C10,C20,C40值及給藥劑量,可使用作圖法、公式法及藥代動力學軟件等方法計算t1/2值。

    Ke為消除速率常數

    Co為初始藥量

    根據藥一時曲線求t1/2

    按測得的血中水楊酸鈉濃度取對數,以對應時間為橫坐標,對數濃度為縱坐標作圖,在此線上找出血藥濃度下降一半的時間,即為該藥的血漿半衰期。

    展開 
    注意事項

    1. 加入10%三氯醋酸后,要立即使用渦旋混合器混勻,防止發生凝固。

    2. 大多數藥物的體內消除過程遵循一級消除動力學規律,藥物代謝動力學規律通常使用房室模型進行模擬。其中較為常用的房室模型為雙室模型。雙室模型包括中央室和周邊室,其血藥濃度-時間曲線可由分布相(α相)與消除相(β相)組成。


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