沉淀σ32和RNA聚合酶實驗

發布時間：2019-09-13 15:44 原文鏈接：沉淀σ32和RNA聚合酶實驗

試劑、試劑盒	聚乙烯亞胺
儀器、耗材	SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠
實驗步驟	材料與設備 SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠（10%) 試劑聚乙烯亞胺（PEI)(6% 儲液，pH7.9) (配方，見“試劑的配制”，pp.184~189) 操作程序 1)0.2%DOC 上清 (見 p.153), 取 6x50-ul 等分試樣。各試樣分別加入 0、1、2、3、4 和 5ul 6%PEI 儲液（使 PEI 濃度分別為 0%、0.12%,0.24%、0.36%、0.48% 和 0,6%), 充分混勻，孵育 5~10 min。 2) 用微型離心機離心 1ml，離下沉淀物。如需要，取上清樣品，供快速蛋白質斑點印跡試驗（見 PP.172?173) 或 SDS 凝膠電泳分析用。做斑點印跡試驗應立即進行。結果典型的顯示 PEI 滴定實驗結果的 SDS 凝膠照片，見圖 3-5。展開

試劑、試劑盒

聚乙烯亞胺

儀器、耗材

SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠

實驗步驟

材料與設備

SDS-PAGE 電泳裝置

聚丙烯酰胺小膠（10%)

試劑

聚乙烯亞胺（PEI)(6% 儲液，pH7.9)

(配方，見“試劑的配制”，pp.184~189)

操作程序

1)0.2%DOC 上清 (見 p.153), 取 6x50-ul 等分試樣。各試樣分別加入 0、1、2、3、4 和 5ul 6%PEI 儲液（使 PEI 濃度分別為 0%、0.12%,0.24%、0.36%、0.48% 和 0,6%), 充分混勻，孵育 5~10 min。

2) 用微型離心機離心 1ml，離下沉淀物。如需要，取上清樣品，供快速蛋白質斑點印跡試驗（見 PP.172?173) 或 SDS 凝膠電泳分析用。做斑點印跡試驗應立即進行。

結果

典型的顯示 PEI 滴定實驗結果的 SDS 凝膠照片，見圖 3-5。