沉淀DNA的實驗——乙醇沉淀法

DNA

乙酸鈉乙醇

EP管低溫離心機移液器-70度冰箱

1. 酶切前確定待切樣品的濃度, 并選擇合適的限制性內切酶和配套Buffer。

2. 在離心管中加入如下成分：

10xBuffer　  1ul

待切樣品　　　xul

酶　　　　　　0.5-1ul

______________________

加水補足10ul

3. 混勻樣品并短暫離心使樣品沉于管底。

4. 將離心管置于37℃中溫育1-3hr，若待切樣品為PCR 產物，則可將反應時間適當延長。

5. 用未酶切的質粒作為對照，瓊脂糖電泳鑒定酶切結果。

注：當酶切樣品用于回收而不是鑒定時，可按比例適當加大反應體積。雙酶切可選用二者活性都較高的Buffer 或者通用Buffer，但要注意不能有星反應。

移去上清液時需要緩慢操作，以免將DNA樣品弄出。

乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。