酸度取本品1.0g,加水10ml使溶解,依法測定(通則0631),pH值應為5.4~6.溶液的澄清度取本品適量,加水溶解并制成每1ml中含0.20g的溶液,溶液應澄清無色;如顯渾濁,與1號濁度標準液(通則0902第一法)比較,不得更濃吸光度取本品,加水溶解并稀釋制成每1m中含0.2g的溶液,照紫外可見分光光度法(通則0401),在400nm的波長處測定,吸光度不得過0.05。氨照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定。試驗應在20~25℃進行。供試品溶液取本品適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含200mg的溶液,搖勻。對照品溶液取氯化銨29.7mg,精密稱定,置500ml量瓶中,加水適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻(每1ml中相當于20g的NH4)。測定法精密量取還原酶Ⅰ溶液(NADH)(取還原型輔酶I適量,用2-氧代戊二酸緩沖液制成每1ml中含0.2mg的溶液。該溶液4℃C可保存3天)1.0ml,置吸收池中,加供試品溶液0.1ml和水1.9ml,混勻,反應5分鐘。
以水為參比,在340nm的波長處測定吸光度A1,再加入谷氨酸脫氫酶溶液(GLDH)(取谷氨酸脫氫酶適量,加水稀釋制成每1m中含1000單位的溶液)0.02ml,混勻,20分鐘后測定吸光度A2。同法測定水和對照品溶液的吸光度,分別為B1、B2和C1、C2按下式計算。(A1-A2)-(B1-B2)n含氨量%=C(C1-C2)-(B1-B,××10-×100式中Cs為對照品溶液的氨濃度,g/ml;n為供試品溶液的稀釋倍數;W為供試品的稱樣量。限度含氨不得過0.17%有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含丙氨酰谷氨酰胺4mg的溶液對照品溶液取主成分與各雜質對照品適量,分別精密稱定,按下表的濃度加流動相溶解并定量稀釋制成。
主成分與雜質對照品濃度(pg/ml)環-(L丙氨酰-L-谷氨酰胺環-(L丙氨酰L谷氨酸1.6L-焦谷氨酰-L-丙氨酸L-焦谷氨酸8D-丙氨酰-L谷氨酰胺丙氨酰谷氨酰胺L-丙氨酰-L-谷氨酸20色譜條件、系統適用性要求與測定法見丙氨酰谷氨酰胺有關物質項下。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,按外標法以峰面積計算,各雜質含量與主成分標示量比較,含環-(L-丙氨酰L谷氨酰胺)不得過0.5%、含環-(L丙氨酰-L谷氨酸)不得過0.04%、含L焦谷氨酰L丙氨酸不得過0.5%、含L焦谷氨酸不得過0.2%、含D丙氨酰谷氨酰胺不得過0.25%含L丙氨酰-L谷氨酸不得過0.5%;其他單個未知雜質按外標法以丙氨酰谷氨酰胺峰面積計算,不得過0.5%,其他未知雜質總和不得過1.0%干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,減失重量不得過1.0%(無菌粉末)或3.0%(無菌凍干品)(通則0831)。
細菌內毒素取本品,依法檢查(通則1143),每1mg中含內毒素的量應小于0.050EU無菌取本品,用0.1%無菌蛋白胨水溶液適量溶解后經薄膜過濾法處理,用0.1%無菌蛋白胨水溶液沖洗(每膜不少于1o0ml),以金黃色葡萄球菌為陽性對照菌,依法檢查(通則1101),應符合規定其他應符合注射劑項下有關的各項規定(通則0102)。
