實驗材料 細胞
試劑、試劑盒 PBS冷乙醇PI 溶液
儀器、耗材 錐形管
實驗步驟
1. 分離細胞并移至 15 ml 的錐形管中。檢查有單個細胞懸浮，1000 g 離心 5 分鐘，棄上清。
2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 將細胞洗 2 次，計數細胞總數，記在管山。
3. 用約 500 μl 的 PBS 重懸細胞。
4. 加 5 ml 冷乙醇，4℃ 固定過夜。
5. 取 5X106 細胞放入 15 ml 錐形管中，1000 g 離心，棄乙醇。
6. 懸攪沉淀，用 5 ml PBS+1% BSA 或小牛血清洗 2 次。
7. 用含 1% BSA 或 1% 小牛血清的 800 μl PBS 重懸細胞沉淀。
8. 加 100 μl 10X PI 溶液。
9. 加入 100 μl 煮沸過的 RNA 酶 A，37℃ 孵育 30 分鐘。
10. 用流式細胞計量術分析固定的樣品。
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