戴安液相色譜柱通常分為正相柱和反相柱,正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主 要以硅膠為基質,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團稱為C18柱,其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等,另外還有離子交換柱, GPC柱,聚合物填料柱等。
戴安液相色譜柱在使用前,好進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱 出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品 、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。
戴安液相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的,應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱,請一定確保您分析樣品所使用的流 動相和乙腈/水互溶。 每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得大的"補償",平衡開始時將流速緩慢地提高, 用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線,緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡。
如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡; 分析結束后 必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。長期使用的戴安液相色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板 數減低),可以對色譜柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。
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