淀粉含量的測定

【原理】

淀粉是由葡萄糖殘基組成的多糖，在酸性條件下加熱使其水解成葡萄糖，然后在濃硫酸的作用下，使單糖脫水生成糠醛類化合物，利用苯酚或蒽酮試劑與糠醛化合物的顯色反應，即可進行比色測定。

【儀器與用具】

電子天平;容量瓶：100ml×4，50ml×2;漏斗;小試管若干支;電爐;刻度吸管0.5ml×1，2.0ml×3，5ml×4;分光光度計  ;記號筆。

【試劑】

(1)濃硫酸(比重1.84);

(2)9.2mol/L HClO4;

(3)2%蒽酮試劑：同蒽酮法(或9%苯酚，同方法一);

(4)淀粉標準液：準確稱取100mg純淀粉，放入100ml容量瓶中，加60～70ml熱蒸餾水，放入沸水浴中煮沸0.5h，冷卻后加蒸餾水稀釋至刻度，則每ml含淀粉1mg，吸取此液5.0ml，加蒸餾水稀釋至50ml，即為每ml含淀粉100μg的標準液。

【方法】

1.標準曲線制作

取小試管11支從0～10編號，按表24-3加入溶液和蒸餾水。

以下步驟按苯酚法或蒽酮法均可，見方法一或方法二，繪制相應的標準曲線。

表24-3 各試管加入標準液和蒸餾水量

2.樣品提取

將提取可溶性糖以后的殘渣，移入50ml容量瓶中，加20ml熱蒸餾水，放入沸水浴中煮沸15min，再加入9.2mol/L高氯酸2ml提取15min，冷卻后，混勻，用濾紙過濾，并用蒸餾水定容(或以2500r/min離心10min)。

3.測定 可采用苯酚法或蒽酮顯色法測定。

按下式計算淀粉的含量。淀粉水解時，在單糖殘基上加了1分子  水，因而計算時所得的糖量乘以0.9才為扣除加入水量后的實際淀粉含量。

淀粉含量(%)=

式中 C-標準曲線查得的淀粉含量(μg);

V-提取液總量(ml);

a-顯色時取液量(ml);

W-樣品重(g)。

注：淀粉水解完全度試驗 樣品測定中可同時作1份用于淀粉水解完全度檢驗的樣品，在酸解過濾后，將其殘渣加上2ml水，攪拌均勻，吸2滴于白瓷盤上，加2滴I2-KI溶液，顯微鏡下觀察，若出現紫藍色顆粒，證明水解不完全，其正式測試樣品需再加高氯酸水解，直至不出現藍紫色為止。