淋巴細胞增殖法對于（1）免疫學的研究（2）淋巴細胞的T細胞，吞噬細胞等的功能研究。
| 實驗方法原理 | 淋巴細胞在體外經某種物質刺激，細胞代謝和形態相繼變化，在24——48h細胞內蛋白質和核酸的合成增加，產生一系列增殖的變化，如細胞變化、細胞漿擴大、出現空泡、核仁明顯、核染色質疏松等，由淋巴細胞轉變為淋巴母細胞。因此，這種淋巴細胞增殖又叫淋巴細胞轉化。據此可判斷出淋巴細胞對有關刺激的反應性與功能狀態。
（1） 非抗原性刺激物：如植物血凝素（PHA）、刀豆素A（ConA）、美洲商陸（PWM）、脂多糖（LPS），通稱促有絲分裂原。其中LPS刺激B細胞，PWM可刺激T和B細胞，PHA和ConA刺激T細胞增殖。
（2） 抗原性刺激物：如結核菌素、葡萄球菌毒素、破傷風類毒素、鏈球菌激酶、腫瘤抗原、同種異型組織抗原等。 |
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| 實驗材料 | PBMC細胞懸液 |
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| 試劑、試劑盒 | RPMI-10完全培養基100ug ml的植物血凝素 |
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| 儀器、耗材 | 96孔板圓底細胞培養板 |
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| 實驗步驟 | 基 本 方案 絲 裂原 誘 導 的 外 周 血 單 個 核 細 胞 增 殖 實 驗材 料
備 選 方 案 1 單向混合淋巴細胞反應附 加 材 料（其他材料見基本方案）R P M I 完 全 培 養 基（R P M I -10A B ) (附錄 1 ) : 含 1 0 % 人 A B 血清， 56°C ， I h 滅活 同種異體刺激細胞（P B M C ; 單 元 8.1) 自體刺激細胞（P B M C ; 單 元 8. 1) 絲裂霉素 C 溶 液 ， 0.5m g /m l ， R P M I -10A B 配 制（避 光 ，無沉淀），或細胞照射二活設備
  展開 |
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| 注意事項 | 1. 細胞培養液終止前6h或18h，在每孔中加入20μL濃度為50μCI/ML的氘代TDR，可適當延長TDR滲入時間。
2. 根據儀器使用說明書徹底清洗細胞收集器 |
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| 其他 | 使用全自動同步細胞收集器，洗滌，裂解細胞，并將DNA轉移到濾紙上，且徹底洗掉為滲入的氘代TDR，100%甲醇洗滌濾紙條，使濾紙條易于干燥，使用半自動細胞收集器時，需將濾紙片放入對應的閃爍管中，人工收集時，將濾片置于燈下觀察烘干，然后用鑷子將濾紙加入對應的閃爍管中，最后在閃爍管中加入閃爍液。
本實驗來自《精編免疫學實驗指南》，作者：J.E.科利根等,譯者：曹雪濤等 |
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