物理因素對細菌的影響
（結合實物在消毒室中介紹）
1.熱力滅菌：
（1）干熱滅菌：
干烤（160～170℃，2h）、焚燒（易燃、廢棄物品）、燒灼（不易燃的物品，如取菌環、試管口）、紅外線：0.77～1000mm電磁波,1～10 mm效應最強。
（2）濕熱滅菌
巴氏消毒法：61.1～62.8℃ 30min；71.7 ℃15～30s’，后一種方法最常用。
煮沸法：100℃ 5min可殺死一般細菌的繁殖體，水中加入2%碳酸氫鈉，沸點可達到105℃。
流通蒸汽法：100℃，15～30min，可殺滅細菌的繁殖體。
高壓蒸汽滅菌法：高壓鍋---在103.4kPa（1.05kg/cm2、、15磅/英寸2）蒸汽壓下，溫度可達121.3℃，維持15～20min，可殺滅芽孢在內的所有微生物。
干熱滅菌與濕熱滅菌的比較：
穿透性；濕熱穿透性強。
潛熱；由氣體轉變為液體時釋放熱量。
菌體蛋白在液體中經加熱易變性。
2.輻射殺菌法：
（1）紫外線（UV）：200～300nm（100+～380nm）;265～266nm殺菌作用最強;使一條鏈上相臨的嘧啶形成二聚體。具有光復活作用，不能用紫外線制備滅活菌苗。紫外線穿透力差，只能用于空氣和物體表面的殺菌。紫外線對人體皮膚、視網膜均有損傷。不能開著紫外線燈工作。
（2）電離輻射：g射線、X射線
（3）微波：11000mm的電磁波
3. 濾過除菌法：濾菌器（filtration）
薄膜濾菌器（0.25nm）、玻璃濾菌器（G1～G6）、石棉濾菌器（K、EK、EKS型）、Seitz濾菌器。適合于不耐熱的液體（血清、細胞因子、抗生素、毒素等）及氣體的濾過。
化學因素對細菌的影響
常用消毒劑：
酚類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑、烷化劑。
作用機理：
1、促進菌體蛋白質變性或凝固；
2、干擾細菌的酶系統和代謝；
3、損傷細菌的細胞膜
1%龍膽紫、2.5%碘酒、75%乙醇、0.1%新潔爾滅（紅汞現在已取消）。
影響消毒劑滅菌效果的因素：
1、消毒劑的性質、濃度與作用時間--乙醇例外，70%乙醇消毒效果最好；
2、微生物的種類與數量；
3、溫度；
4、pH；
5、有機物。
消毒劑對人體毒性太大，只能外用，不能口服或注射。
藥物敏感試驗
材料
1、菌種：大腸桿菌、葡萄球菌
2、藥敏紙片、接種環、鑷子、酒精燈、培養箱等
原理
在已接種被測細菌的瓊脂平板上，平貼含有一定量抗菌藥物的藥敏紙片，由于培養基中含大量的水分，所以抗菌藥物很快溶解于培養基內，并向四周擴散，藥物在瓊脂中的濃度隨離開紙片的距離增大而降低，當低于MIC時細菌則生長而形成抑菌環。
在藥物濃度恰高于該藥物對該菌的最低抑菌濃度的瓊脂中，該細菌的生長就受到抑制，在藥物濃度低于該藥物對該菌的最低抑菌濃度的瓊脂中，細菌能夠生長。孵育后，在含藥紙片的周圍形成透明的抑菌環，量取該抑菌環的直徑，可測得該細菌對相應藥物的敏感度。
培養基：水解酪蛋白瓊脂（M-H瓊脂）
抑菌環的直徑與最低抑菌濃度（MIC）呈負相關。
方法：
同連續劃線接種法密集接種細菌（改良的K-B法）。
用無菌鑷子夾取藥敏制片，分別貼于平板上，各藥敏紙片之間的距離應基本相等，一般每個平板貼四個藥敏紙片。
37℃、培養24h后測定抑菌圈，作出結果判定。
敏感程度判斷標準：<10mm---耐藥；10-15mm----中度敏感；>15mm---敏感（非檢驗專業）
質量控制：培養基（M-H瓊脂）、紙片性質與直徑（吸水紙、直徑6mm）、每張紙片吸水2ml，抗生素含量（青霉素10m、紅霉素15mg）、接種細菌的量（相當于1/2 0.5麥氏比濁管濃度，即0.75×108）。瓊脂厚度為4mm土lmm （平板直徑？9cm）。
定量實驗有：試管稀釋法、E-試驗
定性實驗可指導臨床醫生使用什么藥物，定量實驗可指導臨床醫生該藥物使用多少量，根據半衰期決定每天給幾次藥。