1、空氣樣本的采集與送檢 常用的空氣微生物檢驗采樣方法有 2 種:平板沉降法和采樣器采集法。
1)采樣器分類:按照采樣方式不同,空氣微生物采樣器可分為兩類,1 類是將微生物直接采到固體培養基上(如 Andersen 采樣器),2 類是先把微生物采到液體或其他介質上,再轉種到培養基或細胞上顯示(如 Porton 采樣器)。根據所檢微生物的性質選擇采樣器。按流量分類:按流量不同,采樣器可分為大、中、小 3 類:3 位數以上為大流量(≥500L/min),2 位數為中流量(499—11L/min),1 位數為小流量(≤10L/min)。按介質性質分類:根據采樣器所用介質可分為固體采樣器和液體采樣器。按工作原理分類:采樣器的工作原理可分為 6 種:撞擊式、沉降式、過濾式、靜電吸附式、旋風式和離心式采樣器。
2)采樣介質:采樣介質對微生物具有支撐、黏附、保護和生物作用。常用有凡士林、聚硅酮、氧化烯二十二烷酮、培養基和 SGB(糖、甘油、牛血清白蛋白)。
3)空氣采樣方法及送檢
a.平板沉降法
采樣時間:根據需要,采樣可選在消毒前、后或在工作中,也可在有人或無人的場所。
采樣分布:根據房間面積確定采樣布點,室內面積<750px2 時,設內、中、外對角線 3點,距墻壁 1m,距地面高 1.5m;>750px2 者,設 4 角及中央 5 點,距墻壁 1m,距地面高 1.5m 處。
采樣方法:將瓊脂平板置于各采樣點,打開平皿蓋,扣放于平皿旁,暴露規定時間,立即蓋好送檢。
b.空氣采樣器采樣
采樣器選擇:采集細菌類大小的活粒子,選用 RCS、LWC-I、Andersen 采樣器,采病毒選用 LVS 采樣器。小體積的采樣器,以裂隙式、Andersen 及撞擊式最常用。高濕度時禁用靜電采樣器;野外不能用大動力的采樣器;醫院應選用噪聲低的采樣器;清潔環境應選用過濾式采樣器。采樣方法:一般室內空氣采樣可按平板沉降法分布。潔凈或生物安全環境布點可參考如下表:
表 潔凈室施工及驗收的必要測點數
風面積(單流向)或室面積(亂流)(m3) | 潔凈度 | |||
100 級 | 1000 級 | 10000 級 | 100000 級 | |
<10 | 2~3 | 2 | 2 | 2 |
10 | 4 | 3 | 2 | 2 |
20 | 8 | 6 | 2 | 2 |
40 | 16 | 13 | 4 | 2 |
80 | 32 | 25 | 8 | 2 |
100 | 40 | 32 | 10 | 3 |
200 | 80 | 63 | 20 | 6 |
400 | 160 | 126 | 40 | 13 |
根據浮菌多少應當采集的最小樣本量見下表:
表 浮游菌最小采樣量
浮游菌上限(cfu/L) | 計算最小采樣量(L) |
10 | 0.3 |
5 | 0.6 |
1 | 3 |
0.5 | 6 |
0.1 | 30 |
0.05 | 60 |
0.01 | 300 |
0.005 | 600 |
0.001 | 3000 |