由酸性染料伊紅（E-）和堿性染料亞甲藍（M+）組成。伊紅通常為鈉鹽，有色部分為陰離子。亞甲藍（又名美藍）為四甲基硫堇染料，有對醌型和鄰醌型兩種結構。通常為氯鹽，即氯化美藍，有色部分為陽離子。美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料（即天青）。將適量伊紅、美藍溶解在甲醇中，即為瑞氏染料。甲醇的作用：一是溶解美藍和伊紅；二是固定細胞形態。
