生物化學上的質譜法推導核酸

這其實你不用要什么過程什么的，只要知道原理，質譜結果軟件會幫你出的，你只需要只要原理，去怎么分析結果就OK了！
質譜是純物質鑒定的最有力工具之一，其中包括相對分子量測定、化學式確定及結構鑒定等。
一、相對分子質量的測定
利用質譜圖上分子離子峰的m/z可以準確的確定該化合物的相對分子質量。一般說來，除同位素峰外，分子離子峰一定是質譜圖上質量數最大的峰，它應該位于質譜圖的最右端。但是，由于有些化合物的分子離子峰穩定性較差，分子離子峰很弱或不存在，給正確識別分子離子峰帶來困難。因此，在判斷分子離子峰時應注意以下問題。
（一）分子離子穩定性的一般規律
分子離子的穩定性與分子結構有關。碳數較多，碳鏈較長（有例外）和有支鏈的分子，分裂幾率較高，其分子離子峰的穩定性較低；具有π鍵的芳香族化合物和共軛。
（ 二）分子離子峰必須符合氮規律
在只含有C、H、O、N的化合物中，含有偶數個（包括零）氮組成的化合物，其相對分子質量必為偶數；含有奇數個氮原子的化合物的相對分子量為奇數。這是因為在由C、H、O、N、S、P鹵素等元素組成的化合物中，只有氮原子的化合價為奇數而質量數為偶數。這個規律稱為"氮律"。不符合"氮律"的離子峰一定不是分子離子峰。
（三）利用碎片峰的合理性判斷分子離子峰
在離子源中，化合物分子電離后，分子離子可以裂解出游離基或中性分子等碎片。若裂解出一個?H或?CH3、H2O、C2H4碎片，對應的碎片峰為M-1、M-15、M-18、M-28等，這叫做存在合理的碎片峰。若出現M-3至M-14，M-21至M-25范圍內的碎片峰，稱為不合理碎片峰，則說明分子離子峰的判斷有錯。表明試樣中可能存在雜質或者把碎片峰錯誤判斷為分子離子峰。表7-2中列出從分子離子中裂解的常見碎片。
表7-2 從分子離子中裂解的常見碎片
（四）利用同位素峰識別分子離子峰
有些元素如35Cl、79Br、32S的同位素37Cl、81Br、34S相對豐度較大，其M+2同位素峰十分明顯，通過M、M+2等質譜峰來推斷分子離子峰，若分子中含一個氯原子時，M峰與M+2峰的強度比為3：1；若分子中含一個溴原子時M峰與M+2峰強度比為1:1，這是因為M峰與M+2同位素峰強度比與分子中同位素種類、豐度有關。總之，同位素離子峰的信息有助于分子離子峰的正確判斷。
（五）由分子離子峰強度變化判斷分子離子峰
在電子轟擊離子源(EI)中，適當降低電子轟擊電壓，分子離子裂解減少、碎片離子減少，則分子離子峰的強度應該增加；在上述措施下，若峰強度不增加，說明不是分子離子峰。逐步降低電子轟擊電壓，仔細觀察m/z最大峰是否在所有離子峰中子后消失，若最后消失即為分子離子峰。

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