物理法主要通過各種物理因素的作用使組織細胞破碎,常用的有以下一些方法。
①反復凍融法 把待破碎樣品冷至20-15℃使之凍固,然后緩慢融化,如此反復操作,大部分動物細胞及細胞內的顆粒可被破碎。
②冷熱交替法 在細菌或病毒中提取蛋白質和核酸時可使用此法。操作時,將材料放入沸水中,在90℃左右維持數分鐘,立即置于冰浴中,使之迅速冷卻,絕大部分細胞被破壞。
③超聲波處理法 此法多用于微生物材料,處理效果與樣品濃度及使用頻率有關。用大腸桿菌制備各種酶時,常選用50~100mg/ml菌體,在1~10kMz頻率下處理10~15min。