用分離的亞細胞組分進行激酶分析

細胞器樣品

激酶分析緩沖液ATP

SDS-PAGE 凝膠

1. 準備反應混合物：反應體積通常是 50~100 ml。

5X 激酶分析緩沖液                              10 μl

[γ-³²P] ATP（終濃度 5 μCi/5μmol/L)      5 μl

水                                                       0~35 μl

細胞器樣品（相當于 1 mg 蛋白質）      1~35 μl

2. 加入激酶，開始反應。

3. 加入 10 ml 冰冷的 5X SDS-PAGE 加樣緩沖液終止反應。

4. 混勻，于沸水浴煮 3 分鐘。

5. 加樣至 SDS-PAGE 凝膠。